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雌三醇(E3)ELISA試劑盒說明書
閱讀:139 發(fā)布時(shí)間:2015-1-29提 供 商 | 上海撫生實(shí)業(yè)有限公司 | 資料大小 | 80KB |
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雌三醇(E3)ELISA試劑盒說明書
本試劑僅供研究使用 標(biāo)本:體液
雌三醇(E3)ELISA試劑盒說明書試驗(yàn)原理:
BFGF試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA).已知BFGF濃度的標(biāo)準(zhǔn)品,、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測,。先將BFGF和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。人堿性成纖維細(xì)胞生長因子ELISA 檢測試劑盒洗滌后,,加入親和素標(biāo)記過的HRP,。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,,然后加入底物A,、B,和酶結(jié)合物同時(shí)作用,。產(chǎn)生顏色,。顏色的深淺和樣品中BFGF的濃度呈比例關(guān)系。
雌三醇(E3)ELISA試劑盒說明書自備材料
1.蒸餾水,。
2.加樣器:5ul,、10ul、50ul,、100ul,、200、500ul,、1000ul,。
3.振蕩器及磁力攪拌器等。
安全性
1.避免直接接觸終止液和底物A,、B,。一旦接觸到這些液體,請(qǐng)盡快用水沖洗,。
2.實(shí)驗(yàn)中不要吃喝,、抽煙或使用化妝品。
3.不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份,。
雌三醇(E3)ELISA試劑盒說明書操作注意事項(xiàng)
1.試劑應(yīng)按標(biāo)簽儲(chǔ)存,,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,,不可保存,。
2.實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,,以免變質(zhì),。
3.不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用,。保質(zhì)前使用,。
4.使用一次性的吸頭以免交叉污染,,吸取終止液和底物A、B液時(shí),,避免使用帶金屬部分的加樣器,。
5.使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品,。
6.洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
7.底物A應(yīng)揮發(fā),,避免長時(shí)間打開蓋子,。底物B對(duì)光敏感,避免長時(shí)間暴露于光下,。避免用手接觸,,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值,。
8.加入試劑的順序應(yīng)一致,,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
9.按照中標(biāo)明的時(shí)間,、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作,。
雌三醇(E3)ELISA試劑盒說明書樣品收集,、處理及保存方法
1,、血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,。收集血液后,,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2,、血漿-----EDTA,、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測,。1000×g離心30分鐘去除顆粒,。
3、細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物,。
4,、保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存,,避免反復(fù)冷凍,。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,,檢測前先離心或過濾,。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍,。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
試劑的準(zhǔn)備
標(biāo)準(zhǔn)品:標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋應(yīng)在實(shí)驗(yàn)時(shí)準(zhǔn)備,,不能儲(chǔ)存,。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。
2.洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋,。
雌三醇(E3)ELISA試劑盒說明書操作步驟
1.使用前,,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,,以免加樣時(shí)加入大量的氣泡,,產(chǎn)生加樣上的誤差。
2.根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔,。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔,。
3.加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔,、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體,。蓋上膜板,,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時(shí),。
4.甩去孔內(nèi)液體,,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,,甩去洗滌液,,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次,。如果用洗板機(jī)洗滌,,洗滌次數(shù)增加一次。
5.每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,,輕輕振蕩混勻,,37℃溫育30分鐘。
6.甩去孔內(nèi)液體,,每孔加滿洗滌液,,振蕩30秒,甩去洗滌液,,用吸水紙拍干,。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,,洗滌次數(shù)增加一次,。
7.每孔加入底物A,、B各50ul,輕輕振蕩混勻,,37℃溫育10分鐘,。避免光照。
8.取出酶標(biāo)板,,迅速加入50ul終止液,,加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。
9.在450nm波長處測定各孔的OD值,。
局限
6號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的,,根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無法得到的結(jié)果。
雌三醇(E3)ELISA試劑盒說明書性能
1. 靈敏度:zui小的檢測濃度小于1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品,。稀釋度的線性,。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。
2. 特異性:不與其它細(xì)胞因子反應(yīng),。
3. 重復(fù)性:板內(nèi),、板間變異系數(shù)均小于10%。
雌三醇(E3)ELISA試劑盒說明書結(jié)果判斷與分析
1,、儀器值:于波長450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值
2,、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)(Y),相應(yīng)的BFGF標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)(X),,做得相應(yīng)的曲線,,樣品的BFGF含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度。
3,、檢測值范圍:0-800pg/ml
4,、敏感度: 1.0 pg/ml
TRACP-5b 小鼠抗酒石酸酸性磷酸酶5b 規(guī)格: 48T/96T
AsAb 小鼠抗精子抗體 規(guī)格: 48T/96T
ATGA/TGAB 小鼠抗甲狀腺球蛋白抗體 規(guī)格: 48T/96T
TPO-Ab 小鼠抗甲狀腺過氧化物酶抗體 規(guī)格: 48T/96T
TPO-Ab 小鼠抗甲狀腺過氧化物酶抗體 規(guī)格: 48T/96T
EMA IgA 小鼠抗肌內(nèi)膜抗體IgA 規(guī)格: 48T/96T
gp210 小鼠抗核膜糖蛋白210抗體 規(guī)格: 48T/96T
AMA 小鼠抗單核細(xì)胞抗體 規(guī)格: 48T/96T
TRAb 小鼠抗促甲狀腺素受體抗體 規(guī)格: 48T/96T
αFodrin IgG/IgA 小鼠抗α-胞襯蛋白抗體IgG/IgA 規(guī)格: 48T/96T
小鼠抗IVIgG抗體ELISA Kit,,48T/96T 小鼠抗IVIgG抗體ELISA Kit,,48T/96T 規(guī)格: 48T/96T
小鼠抗IgE受體抗體ELISA Kit,48T/96T 小鼠抗IgE受體抗體ELISA Kit,,48T/96T 規(guī)格: 48T/96T
MIF 小鼠巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子 規(guī)格: 48T/96T
MIP-5 小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白5 規(guī)格: 48T/96T
MIP-3β 小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白3β 規(guī)格: 48T/96T
MIP-3α 小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白3α 規(guī)格: 48T/96T
MIP-2 小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白2 規(guī)格: 48T/96T
MIP-1δ/CCL15 小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白1δ 規(guī)格: 48T/96T
MIP-1β/CCL4 小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白1β 規(guī)格: 48T/96T
MIP-1α/CCL3 小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白1α 規(guī)格: 48T/96T
AmAC-1 小鼠巨噬細(xì)胞替代激活相關(guān)化學(xué)因子1 規(guī)格: 48T/96T
MDC/CCL22 小鼠巨噬細(xì)胞來源的趨化因子 規(guī)格: 48T/96T
M-CSF 小鼠巨噬細(xì)胞集落刺激因子 規(guī)格: 48T/96T
ADAM8 小鼠解整合素樣金屬蛋白酶8 規(guī)格: 48T/96T
UU-Ab 小鼠解脲脲原體抗體 規(guī)格: 48T/96T
CNTF 小鼠睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子 規(guī)格: 48T/96T
Hpt/HP 小鼠結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白 規(guī)格: 48T/96T
CTGF 小鼠結(jié)締組織生長因子 規(guī)格: 48T/96T
Des 小鼠結(jié)蛋白 規(guī)格: 48T/96T
CCA 小鼠結(jié)腸癌抗原 規(guī)格: 48T/96T
KAF 小鼠角化細(xì)胞內(nèi)分泌因子 規(guī)格: 48T/96T
GDNF 小鼠膠質(zhì)細(xì)胞系來源的神經(jīng)營養(yǎng)因子 規(guī)格: 48T/96T
Collagenase II 小鼠膠原酶II 規(guī)格: 48T/96T
Collagenase I 小鼠膠原酶I 規(guī)格: 48T/96T
PCT 小鼠降鈣素原 規(guī)格: 48T/96T
CGRP 小鼠降鈣素基因相關(guān)肽 規(guī)格: 48T/96T
CT 小鼠降鈣素 規(guī)格: 48T/96T
ALP 小鼠堿性磷酸酶 規(guī)格: 48T/96T
bFGF-9 小鼠堿性成纖維細(xì)胞生長因子9 規(guī)格: 48T/96T
bFGF-6 小鼠堿性成纖維細(xì)胞生長因子6 規(guī)格: 48T/96T
bFGF-4 小鼠堿性成纖維細(xì)胞生長因子4 規(guī)格: 48T/96T
bFGF 小鼠堿性成纖維細(xì)胞生長因子 規(guī)格: 48T/96T
TAb 小鼠甲狀腺素抗體 規(guī)格: 48T/96T
T4 小鼠甲狀腺素 規(guī)格: 48T/96T
TG 小鼠甲狀腺球蛋白 規(guī)格: 48T/96T
TPO 小鼠甲狀腺過氧化物酶 規(guī)格: 48T/96T
PTHrP 小鼠甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白 規(guī)格: 48T/96T