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糖合酶3（CHSY3）ELISA試劑盒說明書
閱讀：167 發(fā)布時間：2015-1-4| 提 供 商 | 上海撫生實業(yè)有限公司 | 資料大小 | 42KB |
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糖合酶3(CHSY3)ELISA試劑盒說明書
本試劑僅供研究使用 標本：體液
糖合酶3(CHSY3)ELISA試劑盒試驗原理：
BFGF試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗（ELISA）.已知BFGF濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測,。先將BFGF和生物素標記的抗體同時溫育,。人堿性成纖維細胞生長因子ELISA 檢測試劑盒洗滌后，加入親和素標記過的HRP,。再經(jīng)過溫育和洗滌,，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物，然后加入底物A,、B,，和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色,。顏色的深淺和樣品中BFGF的濃度呈比例關(guān)系,。
糖合酶3(CHSY3)ELISA試劑盒自備材料
1．蒸餾水。
2．加樣器：5ul,、10ul,、50ul、100ul,、200,、500ul、1000ul,。
3．振蕩器及磁力攪拌器等,。
安全性
1．避免直接接觸終止液和底物A、B,。一旦接觸到這些液體,，請盡快用水沖洗。
2．實驗中不要吃喝,、抽煙或使用化妝品,。
3．不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
糖合酶3(CHSY3)ELISA試劑盒操作注意事項
1．試劑應(yīng)按標簽儲存,，使用前恢復(fù)到室溫,。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄,，不可保存,。
2．實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,，密封保存，以免變質(zhì),。
3．不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好,。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用,。
4．使用一次性的吸頭以免交叉污染,，吸取終止液和底物A、B液時,，避免使用帶金屬部分的加樣器,。
5．使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品,。
6．洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干,，不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水。
7．底物A應(yīng)揮發(fā),，避免長時間打開蓋子,。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下,。避免用手接觸,，有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值,。
8．加入試劑的順序應(yīng)一致,，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
9．按照中標明的時間,、加液的量及順序進行溫育操作,。
糖合酶3(CHSY3)ELISA試劑盒樣品收集、處理及保存方法
1,、血清-----操作過程中避免任何細胞刺激,。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,，1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離,。
2、血漿-----EDTA,、檸檬酸鹽,、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒,。
3,、細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4,、保存------如果樣品不立即使用,，應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存,，避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血,。如果血清中大量顆粒,，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍,。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。
試劑的準備
標準品：標準品的系列稀釋應(yīng)在實驗時準備，不能儲存,。稀釋前將標準品振蕩混勻,。
2．洗滌緩沖液（50×）的稀釋：蒸餾水50倍稀釋。
糖合酶3(CHSY3)ELISA試劑盒操作步驟
1．使用前,，將所有試劑充分混勻,。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡,，產(chǎn)生加樣上的誤差,。
2．根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復(fù)孔,。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。
3．加入稀釋好后的標準品50ul于反應(yīng)孔,、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi),。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,，輕輕振蕩混勻,，37℃溫育1小時。
4．甩去孔內(nèi)液體,，每孔加滿洗滌液,，振蕩30秒，甩去洗滌液,，用吸水紙拍干,。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌,，洗滌次數(shù)增加一次,。
5．每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻,，37℃溫育30分鐘,。
6．甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒,，甩去洗滌液,，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次,。如果用洗板機洗滌，洗滌次數(shù)增加一次,。
7．每孔加入底物A,、B各50ul，輕輕振蕩混勻,，37℃溫育10分鐘,。避免光照。
8．取出酶標板,，迅速加入50ul終止液,，加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。
9．在450nm波長處測定各孔的OD值,。
局限
6號標準品以上的結(jié)果為非線性的,，根據(jù)此標準曲線無法得到的結(jié)果。
糖合酶3(CHSY3)ELISA試劑盒性能
1. 靈敏度：zui小的檢測濃度小于1號標準品,。稀釋度的線性,。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。
2. 特異性：不與其它細胞因子反應(yīng),。
3. 重復(fù)性：板內(nèi),、板間變異系數(shù)均小于10%。
糖合酶3(CHSY3)ELISA試劑盒結(jié)果判斷與分析
1,、儀器值：于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值
2,、以吸光度OD值為縱坐標（Y），相應(yīng)的BFGF標準品濃度為橫坐標（X）,，做得相應(yīng)的曲線,，樣品的BFGF含量可根據(jù)其OD值由標準曲線換算出相應(yīng)的濃度。
3,、檢測值范圍：0-800pg/ml
4,、敏感度： 1.0 pg/ml
UP 人尿蛋白 規(guī)格： 48T/96T
GDI 人鳥苷酸解離抑制因子 規(guī)格： 48T/96T
GEF 人鳥苷酸交換因子 規(guī)格： 48T/96T
ODC 人鳥氨酸脫羧酶 規(guī)格： 48T/96T
ODC 人鳥氨酸脫羧酶 規(guī)格： 48T/96T
OCT 人鳥氨酸氨基甲酰轉(zhuǎn)移酶 規(guī)格： 48T/96T
FAK 人黏著斑激酶 規(guī)格： 48T/96T
MAdCAM-1 人黏膜地址素細胞黏附分子 規(guī)格： 48T/96T
BDNF 人腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子 規(guī)格： 48T/96T
BNP 人腦鈉素/腦鈉尿肽 規(guī)格： 48T/96T
NGB 人腦紅蛋白 規(guī)格： 48T/96T
ENK 人腦啡肽 規(guī)格： 48T/96T
BGP/Gehrelin 人腦腸肽 規(guī)格： 48T/96T
visfatin 人內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素 規(guī)格： 48T/96T
vaspin 人內(nèi)臟脂肪特異性絲氨酸蛋白酶抑制劑 規(guī)格： 48T/96T
EL 人內(nèi)皮脂肪酶 規(guī)格： 48T/96T