資料下載
骨膜蛋白(POSTN)ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)
閱讀:204 發(fā)布時(shí)間:2014-9-22提 供 商 | 上海撫生實(shí)業(yè)有限公司 | 資料大小 | 90.5KB |
---|---|---|---|
資料圖片 | 下載次數(shù) | 240次 | |
資料類型 | WORD 文檔 | 瀏覽次數(shù) | 204次 |
免費(fèi)下載 | 點(diǎn)擊下載 |
骨膜蛋白(POSTN)ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)
本試劑僅供研究使用 標(biāo)本:體液
骨膜蛋白(POSTN)ELISA試劑盒試驗(yàn)原理:
BFGF試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA).已知BFGF濃度的標(biāo)準(zhǔn)品,、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè),。先將BFGF和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育,。人堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子ELISA 檢測(cè)試劑盒洗滌后,,加入親和素標(biāo)記過(guò)的HRP,。再經(jīng)過(guò)溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,,然后加入底物A,、B,和酶結(jié)合物同時(shí)作用,。產(chǎn)生顏色,。顏色的深淺和樣品中BFGF的濃度呈比例關(guān)系。
骨膜蛋白(POSTN)ELISA試劑盒自備材料
1.蒸餾水,。
2.加樣器:5ul,、10ul、50ul,、100ul,、200,、500ul、1000ul,。
3.振蕩器及磁力攪拌器等,。
安全性
1.避免直接接觸終止液和底物A、B,。一旦接觸到這些液體,,請(qǐng)盡快用水沖洗。
2.實(shí)驗(yàn)中不要吃喝,、抽煙或使用化妝品,。
3.不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
操作注意事項(xiàng)
1.試劑應(yīng)按標(biāo)簽儲(chǔ)存,,使用前恢復(fù)到室溫,。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存,。
2.實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,,以免變質(zhì),。
3.不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用,。保質(zhì)前使用,。
4.使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A,、B液時(shí),,避免使用帶金屬部分的加樣器。
5.使用干凈的塑料容器配置洗滌液,。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品,。
6.洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水,。
7.底物A應(yīng)揮發(fā),,避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感,,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下,。避免用手接觸,有毒,。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值,。
8.加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣,。
9.按照中標(biāo)明的時(shí)間,、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作,。
樣品收集、處理及保存方法
1,、血清-----操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激,。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離,。
2、血漿-----EDTA,、檸檬酸鹽,、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒,。
3,、細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4,、保存------如果樣品不立即使用,,應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍,。盡可能的不要使用溶血或高血脂血,。如果血清中大量顆粒,檢測(cè)前先離心或過(guò)濾,。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍,。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
試劑的準(zhǔn)備
標(biāo)準(zhǔn)品:標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋?xiě)?yīng)在實(shí)驗(yàn)時(shí)準(zhǔn)備,,不能儲(chǔ)存,。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。
2.洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋,。
操作步驟
1.使用前,,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,,以免加樣時(shí)加入大量的氣泡,,產(chǎn)生加樣上的誤差。
2.根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔,。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來(lái)定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔,。
3.加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔,、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體,。蓋上膜板,,輕輕振蕩混勻,,37℃溫育1小時(shí)。
4.甩去孔內(nèi)液體,,每孔加滿洗滌液,,振蕩30秒,甩去洗滌液,,用吸水紙拍干,。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,,洗滌次數(shù)增加一次,。
5.每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,,37℃溫育30分鐘,。
6.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,,振蕩30秒,,甩去洗滌液,用吸水紙拍干,。重復(fù)此操作3次,。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次,。
7.每孔加入底物A,、B各50ul,,輕輕振蕩混勻,,37℃溫育10分鐘。避免光照,。
8.取出酶標(biāo)板,,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果,。
9.在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值,。
局限
6號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的,根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無(wú)法得到的結(jié)果,。
試劑盒性能
1. 靈敏度:zui小的檢測(cè)濃度小于1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品,。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990,。
2. 特異性:不與其它細(xì)胞因子反應(yīng),。
3. 重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%,。
骨膜蛋白(POSTN)ELISA試劑盒結(jié)果判斷與分析
1,、儀器值:于波長(zhǎng)450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值
2,、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)(Y),相應(yīng)的BFGF標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)(X),,做得相應(yīng)的曲線,,樣品的BFGF含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度。
3,、檢測(cè)值范圍:0-800pg/ml
4,、敏感度: 1.0 pg/ml
SP-A 人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A 規(guī)格: 48T/96T
人肺癌標(biāo)志物ELISA Kit,48T/96T 人肺癌標(biāo)志物ELISA Kit,,48T/96T 規(guī)格: 48T/96T
DR-70TM 人肺癌標(biāo)志物DR-70 規(guī)格: 48T/96T
LTA 人非小細(xì)胞肺癌抗原 規(guī)格: 48T/96T
NNE 人非神經(jīng)元性烯醇化酶 規(guī)格: 48T/96T
NON 人非甲基化寡核苷酸 規(guī)格: 48T/96T
AhR 人芳香烴受體 規(guī)格: 48T/96T
E1/UBAE 人泛素激活酶 規(guī)格: 48T/96T
Ub 人泛素蛋白 規(guī)格: 48T/96T
rT3 人反三碘甲狀腺原氨酸 規(guī)格: 48T/96T
DNM2 人發(fā)動(dòng)蛋白 規(guī)格: 48T/96T
DPPⅣ 人二肽基肽酶Ⅳ 規(guī)格: 48T/96T
人二磷酸尿核苷葡糖醛酸基轉(zhuǎn)移酶2家族肽B4 人二磷酸尿核苷葡糖醛酸基轉(zhuǎn)移酶2家族肽B4 規(guī)格: 48T/96T
SLC/CCL21 人二級(jí)淋巴組織趨化因子 規(guī)格: 48T/96T
DAO 人二胺氧化酶 規(guī)格: 48T/96T
CA 人兒茶酚胺 規(guī)格: 48T/96T
PMN Elastase 人多形核白細(xì)胞彈性蛋白酶 規(guī)格: 48T/96T
PMN Elastase 人多形核白細(xì)胞彈性蛋白酶 規(guī)格: 48T/96T
PTN 人多效生長(zhǎng)因子 規(guī)格: 48T/96T
PTN 人多效生長(zhǎng)因子 規(guī)格: 48T/96T
poly-IgR 人多免疫球蛋白受體 規(guī)格: 48T/96T
PHSA 人多聚血清蛋白 規(guī)格: 48T/96T
PARP 人多聚ADP核糖聚合酶 規(guī)格: 48T/96T
DDC 人多巴胺脫羧酶 規(guī)格: 48T/96T
DBH 人多巴胺-β羥化酶 規(guī)格: 48T/96T
D2R 人多巴胺D2受體 規(guī)格: 48T/96T
D1R 人多巴胺D1受體 規(guī)格: 48T/96T
D1R 人多巴胺D1受體 規(guī)格: 48T/96T
DA 人多巴胺 規(guī)格: 48T/96T
PON 人對(duì)氧磷酶 規(guī)格: 48T/96T
PABA 人對(duì)氨基苯甲酸 規(guī)格: 48T/96T
TE 人端粒酶 規(guī)格: 48T/96T
TSST-1 人毒性休克綜合征毒素1 規(guī)格: 48T/96T
HDV IgM 人丁型肝炎IgM 規(guī)格: 48T/96T
HDV IgG 人丁型肝炎IgG 規(guī)格: 48T/96T
AZT 人疊氮胸苷 規(guī)格: 48T/96T
ASK-1 人凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激酶I 規(guī)格: 48T/96T
FASL 人凋亡相關(guān)因子配體 規(guī)格: 48T/96T
FAS/CD95 人凋亡相關(guān)因子 規(guī)格: 48T/96T
βAPP 人淀粉樣前體蛋白 規(guī)格: 48T/96T
Amylase 人淀粉酶 規(guī)格: 48T/96T
ETFB 人電子轉(zhuǎn)移黃素蛋白β肽 規(guī)格: 48T/96T
FⅧAg 人第八因子相關(guān)抗原 規(guī)格: 48T/96T
Resistin 人抵抗素 規(guī)格: 48T/96T
HIF-1α 人低氧誘導(dǎo)因子1α 規(guī)格: 48T/96T
LRP-6 人低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白6 規(guī)格: 48T/96T
LDLR 人低密度脂蛋白受體 規(guī)格: 48T/96T
LDL-IC 人低密度脂蛋白免疫復(fù)合物 規(guī)格: 48T/96T
LDL 人低密度脂蛋白 規(guī)格: 48T/96T
LMP7/PSMB9 人低分子質(zhì)量蛋白7 規(guī)格: 48T/96T
LMWH 人低分子肝素 規(guī)格: 48T/96T
NGF 人的神經(jīng)生長(zhǎng)因子 規(guī)格: 48T/96T
人的牛血清白蛋白殘留檢測(cè)ELISA Kit,,48T/96T
人的牛血清白蛋白殘留檢測(cè)ELISA Kit,48T/96T 規(guī)格: 48T/96T
ConA 人刀豆素A 規(guī)格: 48T/96T
PLP 人蛋白脂質(zhì)蛋白抗體 規(guī)格: 48T/96T