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生長激素2(GH2)ELISA試劑盒說明書
閱讀:193 發(fā)布時間:2014-9-15提 供 商 | 上海撫生實業(yè)有限公司 | 資料大小 | 89.5KB |
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生長激素2(GH2)ELISA試劑盒說明書
本試劑僅供研究使用 標本:體液
生長激素2(GH2)ELISA試劑盒試驗原理:
BFGF試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知BFGF濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測,。先將BFGF和生物素標記的抗體同時溫育,。人堿性成纖維細胞生長因子ELISA 檢測試劑盒洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,,去除未結合的酶結合物,,然后加入底物A、B,,和酶結合物同時作用,。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中BFGF的濃度呈比例關系,。
生長激素2(GH2)ELISA試劑盒自備材料
1.蒸餾水,。
2.加樣器:5ul、10ul,、50ul,、100ul、200,、500ul,、1000ul。
3.振蕩器及磁力攪拌器等,。
安全性
1.避免直接接觸終止液和底物A,、B。一旦接觸到這些液體,,請盡快用水沖洗,。
2.實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品,。
3.不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份,。
操作注意事項
1.試劑應按標簽儲存,使用前恢復到室溫,。稀稀過后的標準品應丟棄,,不可保存。
2.實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,,密封保存,,以免變質。
3.不用的其它試劑應包裝好或蓋好,。不同批號的試劑不要混用,。保質前使用。
4.使用一次性的吸頭以免交叉污染,,吸取終止液和底物A,、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器,。
5.使用干凈的塑料容器配置洗滌液,。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品,。
6.洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水,。
7.底物A應揮發(fā),,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,,避免長時間暴露于光下,。避免用手接觸,有毒,。實驗完成后應立即讀取OD值,。
8.加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣,。
9.按照中標明的時間,、加液的量及順序進行溫育操作。
樣品收集,、處理及保存方法
1,、血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,。收集血液后,,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2,、血漿-----EDTA,、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測,。1000×g離心30分鐘去除顆粒,。
3、細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物,。
4,、保存------如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70 ℃保存,,避免反復冷凍,。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,,檢測前先離心或過濾,。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍,。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。
試劑的準備
標準品:標準品的系列稀釋應在實驗時準備,不能儲存,。稀釋前將標準品振蕩混勻,。
2.洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。
操作步驟
1.使用前,將所有試劑充分混勻,。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差,。
2.根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,,能使用復孔的盡量做復孔,。
3.加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內(nèi),。立即加入50ul的生物素標記的抗體,。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,,37℃溫育1小時,。
4.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,,振蕩30秒,,甩去洗滌液,用吸水紙拍干,。重復此操作3次,。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次,。
5.每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘,。
6.甩去孔內(nèi)液體,,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,,甩去洗滌液,,用吸水紙拍干。重復此操作3次,。如果用洗板機洗滌,,洗滌次數(shù)增加一次。
7.每孔加入底物A,、B各50ul,,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘,。避免光照,。
8.取出酶標板,,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應立即測定結果,。
9.在450nm波長處測定各孔的OD值,。
局限
6號標準品以上的結果為非線性的,根據(jù)此標準曲線無法得到的結果,。
試劑盒性能
1. 靈敏度:zui小的檢測濃度小于1號標準品,。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值為0.990,。
2. 特異性:不與其它細胞因子反應,。
3. 重復性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%,。
生長激素2(GH2)ELISA試劑盒結果判斷與分析
1,、儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值
2、以吸光度OD值為縱坐標(Y),,相應的BFGF標準品濃度為橫坐標(X),,做得相應的曲線,樣品的BFGF含量可根據(jù)其OD值由標準曲線換算出相應的濃度,。
3,、檢測值范圍:0-800pg/ml
4、敏感度: 1.0 pg/ml
GKRP 人葡萄糖激酶調(diào)節(jié)蛋白 規(guī)格: 48T/96T
GCK 人葡萄糖激酶 規(guī)格: 48T/96T
GPI 人葡萄糖6磷酸異構酶 規(guī)格: 48T/96T
SPA 人葡萄球菌蛋白A 規(guī)格: 48T/96T
Tetanus Ab 人破傷風抗體 規(guī)格: 48T/96T
ODF 人破骨細胞分化因子 規(guī)格: 48T/96T
Prednisolone 人潑尼松龍 規(guī)格: 48T/96T
SMM 人平滑肌肌球蛋白 規(guī)格: 48T/96T
Syk 人脾臟酪氨酸激酶 規(guī)格: 48T/96T
CORT 人皮質酮/腎上腺酮 規(guī)格: 48T/96T
Cortisol 人皮質醇 規(guī)格: 48T/96T
CLA 人皮膚淋巴細胞相關抗原 規(guī)格: 48T/96T
SRF/IF 人皮膚反應因子/炎性因子 規(guī)格: 48T/96T
DPT 人皮膚蛋白 規(guī)格: 48T/96T
CTACK/CCL27 人皮膚T細胞虜獲趨化因子 規(guī)格: 48T/96T
FSA 人胚胎性硫糖蛋白抗原 規(guī)格: 48T/96T
CIAP 人牛小腸堿性磷酸酶 規(guī)格: 48T/96T
FⅫ 人凝血因子Ⅻ 規(guī)格: 48T/96T
FⅩⅢ 人凝血因子ⅩⅢ 規(guī)格: 48T/96T
FⅩ 人凝血因子Ⅹ 規(guī)格: 48T/96T
FⅨ 人凝血因子Ⅸ 規(guī)格: 48T/96T
Ⅷ-Ag 人凝血因子Ⅷ相關抗原 規(guī)格: 48T/96T
FⅢ 人凝血因子Ⅲ 規(guī)格: 48T/96T
FⅡ 人凝血因子Ⅱ 規(guī)格: 48T/96T
F1+2 人凝血酶原片段F1+2 規(guī)格: 48T/96T
T-TM 人凝血酶血栓調(diào)節(jié)蛋白復合物 規(guī)格: 48T/96T
TR 人凝血酶受體 規(guī)格: 48T/96T
TAT 人凝血酶抗凝血酶復合物 規(guī)格: 48T/96T
Gelsolin 人凝溶膠蛋白 規(guī)格: 48T/96T
CLU 人凝聚素 規(guī)格: 48T/96T
gelson 人凝膠原蛋白 規(guī)格: 48T/96T
UFC 人尿游離皮質醇 規(guī)格: 48T/96T
ALB 人尿微量白蛋白 規(guī)格: 48T/96T
UreC 人尿素酶相關蛋白C 規(guī)格: 48T/96T
PLAUR/uPAR 人尿激酶型纖溶酶原激活物受體 規(guī)格: 48T/96T
uPA/PLAU 人尿激酶型纖溶酶原激活物 規(guī)格: 48T/96T
uPA/PLAU 人尿激酶型纖溶酶原激活物 規(guī)格: 48T/96T
uPA 人尿激酶型纖溶酶原激活物 規(guī)格: 48T/96T
UK 人尿激酶 規(guī)格: 48T/96T
UP 人尿蛋白 規(guī)格: 48T/96T
GDI 人鳥苷酸解離抑制因子 規(guī)格: 48T/96T
GEF 人鳥苷酸交換因子 規(guī)格: 48T/96T
ODC 人鳥氨酸脫羧酶 規(guī)格: 48T/96T
ODC 人鳥氨酸脫羧酶 規(guī)格: 48T/96T
OCT 人鳥氨酸氨基甲酰轉移酶 規(guī)格: 48T/96T
FAK 人黏著斑激酶 規(guī)格: 48T/96T
MAdCAM-1 人黏膜地址素細胞黏附分子 規(guī)格: 48T/96T
BDNF 人腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子 規(guī)格: 48T/96T
BNP 人腦鈉素/腦鈉尿肽 規(guī)格: 48T/96T
NGB 人腦紅蛋白 規(guī)格: 48T/96T
ENK 人腦啡肽 規(guī)格: 48T/96T
BGP/Gehrelin 人腦腸肽 規(guī)格: 48T/96T
visfatin 人內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素 規(guī)格: 48T/96T
vaspin 人內(nèi)臟脂肪特異性絲氨酸蛋白酶抑制劑 規(guī)格: 48T/96T
EL 人內(nèi)皮脂肪酶 規(guī)格: 48T/96T
ES 人內(nèi)皮抑素 規(guī)格: 48T/96T
eNOS-3 人內(nèi)皮型一氧化氮合成酶3 規(guī)格: 48T/96T
eNOS 人內(nèi)皮型一氧化氮合成酶 規(guī)格: 48T/96T
ET-1 人內(nèi)皮素1 規(guī)格: 48T/96T