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ELISA試劑盒要求準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)中需用
閱讀:103 發(fā)布時(shí)間:2014-8-8提 供 商 | 上海撫生實(shí)業(yè)有限公司 | 資料大小 | 2.7KB |
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ELISA試劑盒要求準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)中需用
可用作ELISA試劑盒測(cè)定的標(biāo)本十分廣泛,體液(如血清 ),、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液,、糞便)等均可作標(biāo)本以測(cè)定其中某種抗體 或抗原成份。有些標(biāo)本可直接進(jìn)行測(cè)定(如血清 ,、尿液),,有些則需經(jīng)預(yù)處理(如糞便和某些分泌物)。
大部分ELISA試劑盒檢測(cè)均以血清為標(biāo)本,。血漿中除尚含有纖維蛋白原和抗凝劑外,,其他成份均同等于血清。制備血漿標(biāo)本需借助于抗凝劑,,而血清標(biāo)本只要待血清自然凝固,、血塊收縮后即可取得。除特殊情況外,,在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中均以血清作為檢測(cè)標(biāo)本,。在ELISA試劑盒中血漿和血清可同等應(yīng)用。一般說(shuō)來(lái),,在5天內(nèi)測(cè)定的血清標(biāo)本可放置于4℃,,ELISA試劑盒檢測(cè)試劑盒超過(guò)一周測(cè)定的需低溫冰存。凍結(jié)血清
融解后,,蛋白質(zhì)局部濃縮,,分布不均,應(yīng)充分混勻宜輕緩,,避免氣泡,,可上下顛倒混和,不要在混勻器上強(qiáng)烈振蕩,?;鞚峄蛴谐恋淼难鍢?biāo)本應(yīng)先離心或過(guò)濾,澄清后再檢測(cè),。反復(fù)凍融會(huì)使抗體 效價(jià)跌落,,所以測(cè)抗體的血清標(biāo)本如需保存作多次檢測(cè),宜少量分裝冰存,。保存血清自采集時(shí)就應(yīng)注意無(wú)菌操作,,ELISA試劑盒也可加入適當(dāng)防腐劑(見(jiàn)3.2.4)。
按試劑盒說(shuō)明書的的試劑,。ELISA試劑盒中用的蒸餾 水或去離子水,,包括用于洗滌的,應(yīng)為新鮮的和高質(zhì)量的,。自配的緩沖液應(yīng)用pH計(jì)測(cè)量較正,。從冰箱中取出的試驗(yàn)用試劑應(yīng)待溫度與室溫平衡后使用,。試劑盒中本次試驗(yàn)不需用的部分應(yīng)及時(shí)放回冰箱保存。
加標(biāo)本一般用微量加樣器,,按規(guī)定的量加入板孔中,。ELISA試劑盒每次加標(biāo)本應(yīng)更換吸嘴,以發(fā)生交叉污染,,也可用一次性的定量塑料管加樣,。有此測(cè)定(如間接法ELISA試劑盒)需用稀的血清,可在試管 中按規(guī)定的稀釋度稀釋后再加樣,。也可在板孔中加入稀釋液,,再在其加入血清標(biāo)本,然后在微型震蕩器上震蕩1分鐘以保證混和,。加酶結(jié)合物應(yīng)用液和底物用液時(shí)可用定量多道加液器,,使加液過(guò)程迅速完成。