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新品ELISA試劑盒操作流程主要有以下幾步

    因?yàn)橹挥蝎@得正確的ELISA試劑盒，下游的分析結(jié)果才可能準(zhǔn)確,。目前,，市面上有多種多樣的分離試劑盒可供選擇，它們的主要區(qū)別在于分離方法和篩選標(biāo)志,。那么,，如何選擇自己的細(xì)胞分離試劑盒呢？希望本文能為你提供一些幫助,。
正向選擇VS負(fù)向選擇
   試劑盒分離試劑盒的工作原理主要有兩種,，正向選擇和負(fù)向選擇。正向選擇的試劑盒直接結(jié)合的抗體來進(jìn)行捕獲,。這種抗體通常與磁珠相連,，可以利用磁鐵將懸液中的抗體-磁珠-復(fù)合物提取出來，再通過二抗將磁珠與目標(biāo)分開,。負(fù)向選擇的試劑盒也采用類似的抗體包被磁珠,，不過這種試劑盒是通過去除樣品中的非目的，來間接捕獲目的。
    這兩種細(xì)胞分離試劑盒如何取舍,，主要取決于目標(biāo)細(xì)胞的表面是否具有特異性強(qiáng)的篩選標(biāo)志,。這樣的篩選標(biāo)志能夠?qū)崿F(xiàn)特異性的捕獲，避免所獲得的細(xì)胞被非目標(biāo)細(xì)胞污染,。如果你的目標(biāo)細(xì)胞剛好具有這樣的篩選標(biāo)志,，那么正向選擇的細(xì)胞分離試劑盒就是*選擇。

   但如果目標(biāo)細(xì)胞并不具有特異性強(qiáng)的篩選標(biāo)志,，那我們還是選用負(fù)向選擇的細(xì)胞分離試劑盒,。如果文獻(xiàn)中找不到適合自己的表面標(biāo)志，我們還可以用目標(biāo)的DNA序列進(jìn)行BLAST搜索,。BLAST搜索結(jié)果會(huì)顯示,，目標(biāo)細(xì)胞上可能表達(dá)的表面標(biāo)志，在此基礎(chǔ)上可以選取用于捕獲的細(xì)胞表面蛋白,。舉例來說,，對(duì)一個(gè)T進(jìn)行BLAST搜索，結(jié)果會(huì)顯示該是否表達(dá)CD4或CD8,。在得知目標(biāo)表達(dá)CD4之后,，我們可以先對(duì)樣品進(jìn)行一個(gè)免疫實(shí)驗(yàn)（如ELISA），以檢驗(yàn)BLAST搜索的結(jié)果,。一旦證實(shí)目標(biāo)的確表達(dá)CD4,，我們就可以用相應(yīng)試劑盒來篩選CD4陽性的T細(xì)胞。