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ELISA試劑盒并保持其免疫活性

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ELISA試劑盒并保持其免疫活性

    ELISA試劑盒是將抗原,、抗體的免疫反應(yīng)和酶的催化反應(yīng)有機(jī)結(jié)合而發(fā)展起來(lái)的一種綜合性技術(shù),。它的基本原理是:使抗原或抗體結(jié)合到某種固相載體表面;抗原或抗體與某種酶聯(lián)結(jié)成美標(biāo)抗原或抗體,,這種酶標(biāo)抗原或抗體即保留其免疫活性,,又保留酶的活性。在測(cè)定時(shí),,使受檢標(biāo)本和酶標(biāo)抗原或抗體按不同的步驟與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng),。

    用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與其他物質(zhì)分開(kāi),zui后結(jié)合在固相載體上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量成一定的比例,。加入酶反應(yīng)的底物后,,底物被酶催化變?yōu)橛猩a(chǎn)物,ELISA試劑盒產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),,故可根據(jù)顏色產(chǎn)反應(yīng)的深淺進(jìn)行定性分析或定量分析,。由于酶的催化效率很高,往往一分子酶在1min內(nèi)可催化數(shù)十萬(wàn)及至上千萬(wàn)分子底物變?yōu)楫a(chǎn)物,,故可極大地放大反應(yīng)信號(hào),,從而使測(cè)定方法達(dá)到很高的靈敏度。

    從以上的原理可知,,整個(gè)ELISA試劑盒試驗(yàn)可分為三個(gè)部分:一是免疫學(xué)反應(yīng)過(guò)程,,包括抗原、抗體,、酶標(biāo)記物之間的反應(yīng),;二是酶和底物反應(yīng)過(guò)程,可以使用不同的酶/底物系統(tǒng),;三是檢測(cè)方法的建立,,可以利用已經(jīng)存在的各種分析手段,,對(duì)酶催化反應(yīng)產(chǎn)生的產(chǎn)物進(jìn)行定量分析,根據(jù)產(chǎn)物的理化性質(zhì),,可采用分光光度法,,也可采用熒光分析法、化學(xué)發(fā)光分析法,、電化學(xué)分析法等分析方法,。光度酶聯(lián)免疫分析常被稱(chēng)為ELISA試劑盒法,即酶聯(lián)免疫吸附分析,。

    它zui早由Engvall和Perlmann與Van Weeman和Schuurs同時(shí)建立,,并用于醫(yī)學(xué)研究。它利用酶標(biāo)記物同抗原抗體復(fù)合物的免疫反應(yīng)與酶的催化放大作用相結(jié)合,,既保持了酶催化反應(yīng)的敏感性,,又保持了抗原抗體反應(yīng)的特異性,因而極大地提高了靈敏度,。同時(shí)它又是一種非均相分析,,即在反應(yīng)中的每一步都有洗滌過(guò)程,從而除去了未反應(yīng)物質(zhì)和干擾物質(zhì),。

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