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ELISA常用方法優(yōu)勢(shì)劣勢(shì)對(duì)比

閱讀:570          發(fā)布時(shí)間:2016-7-11

一、直接法:將抗原直接固定在固相載體上,,加入酶標(biāo)記的一級(jí)抗體,,即可測(cè)定抗原總量,此一級(jí)抗體的特異性非常重要,。ELISA試劑盒

優(yōu)勢(shì):操作手續(xù)簡(jiǎn)短,,因無(wú)須使用二抗可避免交互反應(yīng),。

劣勢(shì):試驗(yàn)中的一抗都得用酶標(biāo)記,但不是每種抗體都適合做標(biāo)記,,費(fèi)用相對(duì)提高,。

二、間接法:此測(cè)定方法與直接法類似,,差別在于一級(jí)抗體沒(méi)有酶標(biāo)記,,改用酶標(biāo)記的二級(jí)抗體去辨識(shí)一級(jí)抗體來(lái)測(cè)定抗原量。

優(yōu)勢(shì):二抗可以加強(qiáng)信號(hào),,而且有多種選擇能做不同的測(cè)定分析,。不加酶標(biāo)記的一級(jí)抗體則能保留它zui多的免疫反應(yīng)性。

劣勢(shì):交互反應(yīng)發(fā)生的機(jī)率較高,。

三,、雙抗體夾心法:被檢測(cè)的抗原包被在兩個(gè)抗體之間,其中一個(gè)抗體將抗原固定于固相載體上,,即捕捉抗體,。另一個(gè)則是檢測(cè)抗體,此抗體可用酶標(biāo)記后直接測(cè)定抗原的量,;或不標(biāo)記,,再透過(guò)酶標(biāo)記的二級(jí)抗體來(lái)測(cè)定抗原的量。這兩種抗體必須小心選取,,才可避免交互反應(yīng)或競(jìng)爭(zhēng)相同的抗原結(jié)合部位,。

優(yōu)勢(shì):高靈敏、高專一性,,抗原無(wú)須事先純化,。

劣勢(shì):抗原一定得擁有兩個(gè)以上的抗體結(jié)合部位。

IGF2R    胰島素樣生長(zhǎng)因子2受體抗體
IKZF3    鋅指蛋白Aiolos抗體
SOX13    胰島細(xì)胞抗原抗體12/核轉(zhuǎn)錄因子SOX13抗體
INSC    有絲分裂相關(guān)蛋白INSC抗體
phospho-IKKi    磷酸化核因子NFκB抑制蛋白激酶i抗體
RanBP7    RAN結(jié)合蛋白7抗體
IGSF9B    免疫球蛋白超家族成員B抗體
IHPK3    六磷酸肌醇激酶3抗體
IFNK    干擾素kappa蛋白抗體
IL-1 Alpha    白介素1α/IL-1α抗體
IL-1 Alpha    白介素1α/IL-1α抗體
phospho-IL2 Receptor beta     磷酸化白介素2受體β鏈抗體
INSL3    胰島素樣蛋白3抗體
IRE1a    內(nèi)質(zhì)網(wǎng)核信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白a1抗體

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