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ELISA試劑盒使用前，將所有試劑充分混勻,。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,，以免加樣時加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差,。

根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),。每個標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔,。
加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔,、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi),。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,，輕輕振蕩混勻,，37℃溫育1小時。
甩去孔內(nèi)液體,，每孔加滿洗滌液,，振蕩30秒，甩去洗滌液,，用吸水紙拍干,。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,，洗滌次數(shù)增加一次,。
每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻,，37℃溫育30分鐘,。
甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液,，振蕩30秒,，甩去洗滌液，用吸水紙拍干,。重復(fù)此操作3次,。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次,。
每孔加入底物A,、B各50ul,，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘,。避免光照,。
取出酶標(biāo)板，迅速加入50ul終止液,，加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果,。
在450nm波長處測定各孔的OD值。

建議使用的實驗方案

6號標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的,，根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無法得到的結(jié)果,。

試劑盒性能

1. 靈敏度：zui小的檢測濃度小于1號標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性,。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990,。

2. 特異性：不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。

3. 重復(fù)性：板內(nèi),、板間變異系數(shù)均小于10%,。

結(jié) 果 判 斷 與 分 析

1、儀器值：于波長450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值

2,、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)（Y）,，相應(yīng)的ICA標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)（X），做得相應(yīng)的曲線,，樣品的ICA含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度,。

3、檢測值范圍：0-40mIU/ml

4,、敏感度： 0.1 mIU/ml

SEPT12    細(xì)胞分化蛋白SEPT12抗體
SNIP1    Smad核相互作用蛋白1抗體
Syntaxin 6    突觸融合蛋白6抗體
Sprouty1    軟脂?；椎鞍譙prouty1抗體
SH3TC2    脫髓鞘相關(guān)蛋白SH3TC2N抗體
SHANK2    富含脯氨酸突觸相關(guān)蛋白SHANK2抗體
SHARPIN    線性泛素鏈相關(guān)蛋白SHARPIN抗體
SAMD7    SAMD7蛋白抗體
SAMD3    SAMD3蛋白抗體
Syntrophin gamma 2    肌蛋白結(jié)合蛋白γ2抗體
SOX22    核轉(zhuǎn)錄因子SOX22抗體
SOX4    核轉(zhuǎn)錄因子SOX4抗體
SUFU/Suppressor of Fused    抑制Hh信號通路蛋白SUFU抗體
SNAIL    Snail蛋白抗體
SARP1    分泌細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白1抗體
SMARCD3    肌動蛋白依賴染色質(zhì)調(diào)控因子SMARCD3蛋白抗體
SLC26    線粒體載體腺嘌呤核苷酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白6抗體
SODD    Bcl2結(jié)合抗凋亡蛋白4抗體
C10orf27    第10號染色體開放閱讀框27抗體
5-HTR2A    5-羥色胺受體2A抗體
5 lipoxygenase    5-脂氧合酶抗體

ELISA試劑盒