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ELISA試劑盒酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）核小體測定

    凋亡細(xì)胞的DNA斷裂使細(xì)胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)核小體,。核小體由組蛋白及其伴隨的DNA片斷組成,，可由ELISA法檢測,。

（一）檢測步驟

1,、將凋亡細(xì)胞裂解后高速離心,，其上清液中含有核小體；

2,、在微定量板上吸附組蛋白體’

3,、加上清夜使抗組蛋白抗體與核小體上的組蛋白結(jié)合‘

4、加辣過氧化物酶標(biāo)記的抗DNA抗體使之與核小體上的DNA結(jié)合’

5,、加酶的底物,，測光吸收制。

（二）用途

    該法敏感性高,，可檢測5*100/ml個(gè)凋亡細(xì)胞,。可用于人,、大鼠,、小鼠的凋亡檢測。該法不需要特殊儀器,，適合基層工作,，但是不能測定凋亡細(xì)胞發(fā)生的絕多對量。

流式細(xì)胞儀定量分析

（一）檢測原理

    細(xì)胞發(fā)生凋亡時(shí),，其細(xì)胞膜的通透性也增加,，但是其程度介于正常細(xì)胞與壞死細(xì)胞之間,。利用這一特點(diǎn)，被檢測細(xì)胞懸液用熒光素染色,，利用流式細(xì)胞儀測量細(xì)胞懸液中細(xì)胞熒光強(qiáng)度來區(qū)分正常細(xì)胞,、壞死細(xì)胞核凋亡細(xì)胞。

（二）應(yīng)用價(jià)值

流式細(xì)胞儀檢測具有以下特點(diǎn)：

1）,、檢測的細(xì)胞數(shù)量大,，因此其反映群體細(xì)胞的凋亡狀態(tài)比較準(zhǔn)確

2）、可以做許多相關(guān)性分析

3）,、結(jié)合被檢測細(xì)胞的DNA含量的分析,，可確定凋亡的細(xì)胞所處的細(xì)胞周期

ELISA試劑盒