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在ELISA檢測系統(tǒng)的關(guān)鍵要素中，包被原的性質(zhì)很重要,，蛋白濃度,，是否降解，這關(guān)系到你做出的抗體可不可以被其識(shí)別,，所以保留抗原很重要,，做重組蛋白時(shí)，一定要在冰浴下緩慢融化就是這個(gè)道理,。封鎖就是讓大量不相關(guān)的蛋白質(zhì)充填這些曠地空閑,，從而排斥ELISA后的步驟中干擾物質(zhì)的再吸附。但有時(shí)因?yàn)樵囼?yàn)的需要,，包被原的特殊性也可能采用中性的緩沖溶液來包,。

    elisa試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。該法適于測定細(xì)胞培養(yǎng)上清,、血清,、血漿及組織液中的樣本,，干擾小可以測到每毫升納克水平的細(xì)胞因子(或受體)的水平。在這種測定方法中有3種必要的試劑：①固相的抗原或抗體,；②酶標(biāo)記的抗原或抗體,；③酶作用的底物。
    根據(jù)ELISA試劑盒試劑的來源和標(biāo)本的性狀以及檢測的具備條件,，可設(shè)計(jì)出各種不同類型的檢測方法,。
(1) 雙抗體夾心法；
(2) 雙位點(diǎn)一步法,；
(3) 間接法測抗體,；
(4) 競爭法；
(5) 捕獲法測IgM抗體,；
(6) 應(yīng)用親和素和生物素,。
elisa試劑盒普遍用作非放射性同位素的成鍵化驗(yàn)。在這種方法中,，通常標(biāo)準(zhǔn)配體是固定的,，通過加入溶液相受體或蛋白質(zhì)來使之成鍵。通過加入與受體特異性反應(yīng)的抗體來定量成鍵的受體,，而且zui初抗體的量以加入第二種能顯色的抗體測量,。第二種抗體能識(shí)別抗體的末端，在其末端的堿性磷酸酯或過氧化物酶等與酶發(fā)生反應(yīng),，從而使溶液顯色,。