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技術(shù)文章

內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)

閱讀:147          發(fā)布時(shí)間:2015-11-18

內(nèi)皮細(xì)胞易于從大血管分離培養(yǎng)成單層細(xì)胞,對(duì)于研究?jī)?nèi)皮細(xì)胞再生,、腫瘤促血管生長(zhǎng)因子(TAF)等有很大價(jià)值,。

elisa試劑盒研究人內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)以人臍帶靜脈灌流消化法zui為簡(jiǎn)便,其法如下:

1,、產(chǎn)后新鮮臍帶,,無(wú)菌剪取 10—15厘米長(zhǎng)一段,如不能立即培養(yǎng),,可于 12小時(shí)內(nèi)保存于 4℃,。

2、用三通注射器吸取溫 PBS液注入臍靜脈中洗去殘血,,在入口處用線繩扎緊,,以防液體返流。

3,、用血管鉗夾緊臍帶一端,,從另一端向臍靜脈中徐徐注入終濃度為 0.1%的粗制膠原酶,充滿血管,,消化 3—10分鐘,;注入口用線繩扎,以防液體返流,。

4,、吸出含有內(nèi)皮細(xì)胞的消化液,于離心管中,,注入溫 PBS輕輕反復(fù)沖洗后,,一并注入離心管中(此步驟可重復(fù))。

5,、離心去上清,,加入 RPMI1640培養(yǎng)液制成細(xì)胞懸液,接種入培養(yǎng)器皿中,,置溫箱培養(yǎng),。兩至三天可見(jiàn)細(xì)胞長(zhǎng)成單層。elisa試劑盒

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