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常用上皮組織及腫瘤標(biāo)記物
閱讀：1973 發(fā)布時(shí)間：2015-10-28角蛋白(Keratin)
elisa試劑盒角蛋白分為表皮角蛋白和細(xì)胞角蛋白兩種，這是根據(jù)其分部的部位而分的,。表皮角蛋白包括皮膚表皮,，消化道粘膜上皮、腺上皮甲狀腺濾泡上皮,、氣管,、支氣管上皮、肺泡上皮,，角膜上皮,、前列腺上皮等。細(xì)胞角蛋白包括頜下腺,，胰腺,，胸腺，細(xì)胞,，肝細(xì)胞,，腎小管細(xì)胞等,。目前,，應(yīng)用上述細(xì)胞中間絲角蛋白作為抗原所制備的抗體有單克隆抗體和多克隆抗體。角蛋白可有19個(gè)亞型 ,，分為堿性和酸性,，從1-8為堿性，9-19為酸性,，分子量40-68不等,，復(fù)層鱗上皮多為高分子量，單層上皮則多為低分子量,，了解這些在臨床的鑒別診斷及抗體的應(yīng)用中都 有極大的幫助,。目前,，檢測(cè)這類特質(zhì)的抗體很多，根據(jù)不同的克隆出不周類型的抗體,。常用的抗體有：
①單克隆小鼠抗人細(xì)胞角蛋白(Monoclonal mouse anti human cytokeratin)克隆為MNF116,。
該抗體應(yīng)用范圍，各類的冰凍切片,，涂片,，細(xì)胞培養(yǎng)片和經(jīng)甲醛固定石蠟包埋的組織切片 。用本抗體檢測(cè)的陽(yáng)性組織有：鱗狀上皮,，甲狀腺濾泡上皮消化道上皮,，胰腺膽管上皮，肝膽管上皮,，角膜上皮等以及發(fā)生于上述來(lái)源的腫瘤,。應(yīng)該注意的是有一些腫瘤在檢測(cè)時(shí)，可出現(xiàn)兩種陽(yáng)性物,，即用兩種抗體來(lái)檢測(cè)如采用CK和Vimentin,，可出現(xiàn)雙向表達(dá)陽(yáng)性的腫瘤有：癌內(nèi)瘤，子宮內(nèi)膜腺癌肺腺癌,，上皮樣內(nèi)瘤,，滑膜內(nèi)瘤，唾液腺肌上皮瘤,，間皮瘤等等,。這是由于在這些腫瘤中存在著兩種不同的中間絲的緣故。
應(yīng)用該抗體檢測(cè)呈陰性的腫瘤有：各種淋巴瘤,，各類肌源性的腫瘤,，惡性黑色素瘤，骨腫瘤,，纖維組織腫瘤,，脂肪腫瘤，神經(jīng)組織腫瘤和精原細(xì)胞瘤等,。
在檢測(cè)某些腫瘤時(shí),，常可出現(xiàn)這樣的問(wèn)題,，在同一張切片上,，同樣的鱗狀細(xì)胞癌的細(xì)胞，有的抗原表達(dá)為強(qiáng)陽(yáng)性,，有的表達(dá)為中度陽(yáng)性性,，有的表達(dá)為弱陽(yáng)性，甚至有的呈陰性,。這主要是由于各種細(xì)胞處于增生的不同階段,，細(xì)胞分泌的抗原量不同,，因而表達(dá) 也不同。
該抗體可用各種方法檢測(cè),，但用真空負(fù)壓LSAB法,。產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)注明該抗體稀釋度1：50至1：100，我們使用為1：100,。
②單克隆小鼠抗人細(xì)胞角蛋白,，克隆為L(zhǎng)P34。該抗體的使用范圍,，檢測(cè)各種組織基本上與①號(hào)抗體相同,，但效果不如①號(hào)。
③單克隆小鼠抗 人細(xì)胞角蛋白,，克隆為35BH11,。該抗體的特點(diǎn)是：A，可檢測(cè)幾乎所有的非鱗狀上皮包括卵巢腺癌,，胃腸道腺癌,，甲狀腺癌，肝癌,， 子宮癌,，腎癌等。B,、不與鱗狀上皮起反應(yīng),。C、對(duì)膀胱癌,，鼻咽癌,，胸腺癌等部分陽(yáng)性。但是,，該 抗體只能用于冰凍切片 ,，涂片和細(xì)胞培養(yǎng)片。不能用于石蠟切片 ,。
elisa試劑盒④單克隆小鼠抗 人細(xì)胞角蛋白,，克隆34BE12。該 抗體屬于高分子量類型,，它可檢測(cè)鱗狀上皮管上皮和 復(fù)層上皮的組織及其來(lái)源的腫瘤,。
適用范圍：可用于各種類型的切片 ,。
2. 單克隆小鼠抗人上皮細(xì)胞膜抗原 (Monoclonal mose anti human epithelial memberance antigen,EMA)
上皮細(xì)胞膜抗原是上皮細(xì)胞表面大分子糖蛋白物質(zhì),，它不僅存在于各種上皮，以及各種上皮來(lái)源的腫瘤,，也可存在于部分非上皮及其來(lái)源的腫瘤,，如漿細(xì)胞,，組織細(xì)胞等。
應(yīng)用EMA來(lái)檢測(cè)正常的組織時(shí),，其陽(yáng)性表達(dá)主要在細(xì)胞膜上,，但在檢測(cè)腫瘤時(shí)，這種陽(yáng)性物不僅在細(xì)胞膜上出現(xiàn),，也可在細(xì)胞漿中見(jiàn)到,。實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，腫瘤細(xì)胞在分化增生時(shí),，陽(yáng)性物表達(dá)強(qiáng)陽(yáng)性,。當(dāng)腫瘤細(xì)胞趨于成熟或已成熟時(shí)，陽(yáng)性物表達(dá)較弱,，腫瘤細(xì)胞未分化時(shí),，抗原表達(dá)呈陰性。
EMA在檢測(cè)上皮組織及其來(lái)源的腫瘤組織時(shí),，抗原表達(dá)陽(yáng)性,，在檢測(cè)非上皮來(lái)源的腫瘤如漿細(xì)胞瘤，滑膜內(nèi)瘤,，上皮樣內(nèi)瘤,，平滑肌內(nèi)瘤，神經(jīng)鞘瘤,，及來(lái)惡性神經(jīng)鞘瘤時(shí),，抗原也可表達(dá)為部分陽(yáng)性。因此認(rèn)為：EMA不是上皮性來(lái)源腫瘤所*的標(biāo)記物,，它的特異性不高,。
該 抗體適用范圍廣，適合于各種類型的切片,，應(yīng)用真空負(fù)壓LSAB法檢測(cè)時(shí),，稀釋度在1：100。
3. 癌胚抗原(Carcinombryonic antigen ,CEA)
自1965年Go等從結(jié)腸癌分離出一種腫瘤的相關(guān)抗原后,，經(jīng)過(guò)進(jìn)一步的研究后發(fā)現(xiàn),，它存在于胎兒的腸里，由于人們將其稱為癌胚抗原,。在實(shí)際應(yīng)用中,，CEA是一種廣譜的標(biāo)記物。經(jīng)實(shí)驗(yàn)證明,，它對(duì)胃癌,，腸癌，肺癌，乳腺癌,，胰腺癌,，子宮頸癌，子宮體腺癌,，卵巢癌,，皮膚鱗狀細(xì)胞癌，膀胱移行上皮癌,，食道癌等,，抗原表達(dá)陽(yáng)性，在上述的同類組織及癌旁類性組織,，也可見(jiàn)到陽(yáng)性物,，有文獻(xiàn)報(bào)導(dǎo)，用CEA標(biāo)記滑膜內(nèi)瘤,，間皮瘤,，上皮樣內(nèi)瘤和腦膜瘤，也可表達(dá)陽(yáng)性,。
目前,，CEA有兩種產(chǎn)品，一是單克隆抗體,，另一是多克隆抗體,。
① 單克隆小鼠抗 人CEA，克隆為A5B7,。
該抗體的特點(diǎn),，純度高，雜質(zhì)含量少,，很少引起非特異性染色,，同時(shí)，也不與含糖蛋白的物質(zhì)起反應(yīng),，因此,，背景清晰干凈。
該抗體可檢測(cè)上述的病種及其來(lái)源的組織,，適用于各種切片的染色,。稀釋度為1：100。
② 兔抗人CEA,。該抗體為多克隆抗體,，純度不如①號(hào)抗體，檢測(cè)及適應(yīng)與①號(hào)抗體相同,，但效果不如①號(hào)抗體,，且較容易產(chǎn)生背景,。稀釋度在1：300。
4.山羊抗人甲胎蛋白(Goat anti human alphafeloprotein,AFP)
AFP主要由胎兒肝細(xì)胞和卵黃細(xì)胞產(chǎn)生的一種酸性糖蛋白少量由胎兒的胸腺,、肺、胃,、腸道的細(xì)胞產(chǎn)生,。AFP也不是一種肝癌*的標(biāo)記物。初用時(shí)把AFP作為原發(fā)性肝癌的一項(xiàng)特異性診斷指標(biāo),。隨著免疫組化的深入開(kāi)展和研究的深入進(jìn)行,，實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明：AFP的升高不僅在原發(fā)性肝細(xì)胞癌的病例，在生殖細(xì)胞腫瘤卵黃瘤和睪丸胚胎癌的病例也可大量見(jiàn)到,。
用AFP檢測(cè)后顯示陽(yáng)性的病例有：原發(fā)性肝細(xì)胞癌,，胃癌，卵黃 瘤和睪丸胚胎癌等,。其陽(yáng)性 表達(dá)部位主要在細(xì)胞漿,，也有少量在細(xì)胞膜和細(xì)胞核上。
該抗體適合于各種切片的標(biāo)記,，可用任何一種 免疫 方法來(lái)進(jìn)行染色,，稀釋度為1：100-1：300。
elisa試劑盒上述四種類型的抗體可作為來(lái)源于上皮的腫瘤及其它來(lái)源的腫瘤的區(qū)別,。只要損傷正確,，抗體的質(zhì)量沒(méi)問(wèn)題，就可獲得滿意的結(jié)果,。使用時(shí)應(yīng)根據(jù)不同的組織,，不同的形態(tài)結(jié)構(gòu)，來(lái)選擇合適的抗體,。當(dāng)然有的腫瘤決不是用一兩種抗體就能夠把它們給予區(qū)分開(kāi)來(lái),。因此，要根據(jù)不同的情況合理使用抗體,，以便作出正確的診斷,。