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elisa試劑盒 1) 免疫方法——免疫途徑
?  常有靜脈,、腹腔,、肌肉、皮下,、皮內(nèi),、淋巴結(jié)、腳掌等注射,。
?  一般采用多點(diǎn)注射方法
–  常在足,、掌、腋窩淋巴結(jié)周圍,、背部?jī)蓚?cè),、頜下、耳后等處的皮內(nèi)或皮下,。
–  皮內(nèi)易引起細(xì)胞免疫反應(yīng),，有利于提高抗體的效價(jià)。

(1) 免疫方法——免疫途徑 (續(xù))
?  幾點(diǎn)說(shuō)明：
–  大動(dòng)物一般不用腹腔注射
–  顆?？乖褪褂米魟r(shí)不能靜脈注射
–  抗原寶貴可采用淋巴結(jié)內(nèi)微量注射法,，只需10～100?g抗原即可獲得較好的免疫效果。
elisa試劑盒–  皮內(nèi)注射較困難,，特別是天冷時(shí)更難注入,。

(2) 免疫方法——次數(shù)及間隔時(shí)間
?  次數(shù)一般為2～3次(初次免疫和加強(qiáng)免疫)
–  注射后，10～15天再加強(qiáng)注射,；
–  劑量同或?yàn)榈囊话?，用不全佐劑或不用佐劑?BR>?  間隔時(shí)間，一般而言,，動(dòng)物越大,，間隔越長(zhǎng)
–  豚鼠、大鼠為7～8天,，兔子為10～15天,，羊?yàn)?4～28天；
–  第三次注射的間隔時(shí)間更長(zhǎng)些,，效果更好,。
舉例1：家兔的免疫
?  初次免疫
–  用50～200?g Ag加入FCA,，在背部皮下注射6～8點(diǎn),，每點(diǎn)0.1～0.2ml,，也可肌肉內(nèi)或皮內(nèi)注射；
?  兩周后,，加強(qiáng)免疫
–  將50～200?g Ag于PBS或FIA中,，在肌肉、皮下,、靜脈或腹腔內(nèi)注射,；
?  抗體效價(jià)的檢測(cè)：加強(qiáng)免疫一周后，耳緣靜脈采血
–  抗體效價(jià)測(cè)定可用環(huán)狀沉淀試驗(yàn),、瓊脂雙向擴(kuò)散法等方法,。前者抗體效價(jià)在1:4000以上，后者在1:16以上,，即可采血,，取血清進(jìn)一步提純。
舉例2：微量抗原淋巴結(jié)內(nèi)注射免疫家兔
?  一般選擇2.5～3.0kg的新西蘭種公兔
–  先在其兩腳墊注射*福氏佐劑0.2ml(卡介苗每兔合5mg),；
–  10天后,，見(jiàn)胭窩淋巴結(jié)腫大，然后將抗原注射至腫大的淋巴結(jié)內(nèi),，*次注射抗原用*福氏佐劑混合乳化,；
–  以后每隔20天用不*福氏佐劑乳化抗原，以同樣方法加強(qiáng)2次,，各次注射的抗原均為25～50?g,；
–  末次注射兩周后兔耳放血測(cè)價(jià) (可達(dá)1:128)。
舉例3：豚鼠和大鼠的免疫
?  初次免疫
–  用10～100?g Ag加入FCA,，在背部皮內(nèi)注射4～6點(diǎn),，每點(diǎn) 0.lml，也可肌肉內(nèi)或皮下注射,；
?  加強(qiáng)免疫
–elisa試劑盒  每隔 7～8天,，將10～50?g Ag于 PBS或FIA中。在肌肉,、皮下或靜脈注射,；
?  抗體效價(jià)的檢測(cè)

(3) 免疫劑量
?  抗原性強(qiáng)的抗原量應(yīng)小，過(guò)大反會(huì)引起免疫抑制,；
?  免疫周期長(zhǎng)的動(dòng)物可少量多次注射,，短的可大量少次。

(3) 免疫劑量 (續(xù))
?  各種動(dòng)物免疫抗原劑量和加強(qiáng)免疫的劑量

(4) 抗體效價(jià)的檢測(cè)
多采免疫雙向擴(kuò)散法