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ELISA試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗（ELISA）.已知sHLA-I濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測。先將sHLA-I和生物素標記的抗體同時溫育,。洗滌后，加入親和素標記過的HRP,。再經(jīng)過溫育和洗滌,，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物，然后加入底物A,、B,，和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色,。顏色的深淺和樣品中sHLA-I的濃度呈比例關(guān)系,。

操作注意事項

1． 試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫,。稀稀過后的標準品應丟棄,，不可保存。

2． 實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,，密封保存,，以免變質(zhì)。

3． 不用的其它試劑應包裝好或蓋好,。不同批號的試劑不要混用,。保質(zhì)前使用。

4． 使用一次性的吸頭以免交叉污染,，吸取終止液和底物A,、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器,。

5． 使用干凈的塑料容器配置洗滌液,。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。

6． 洗滌酶標板時應充分拍干,，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水,。

7． 底物A應揮發(fā)，避免長時間打開蓋子,。底物B對光敏感,，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,，有毒,。實驗完成后應立即讀取OD值。

8． 加入試劑的順序應一致,，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣,。

9． 按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作,。 

ELISA試劑盒樣品收集,、處理及保存方法

1,、 血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,。收集血液后,，1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。

2,、 血漿-----EDTA,、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測,。1000×g離心30分鐘去除顆粒,。

3、 人可溶性白細胞抗原sHLA-I細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物,。

4,、 組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,，取上清液

5,、 ELISA試劑盒保存------如果樣品不立即使用，應將其分成小部分-70 ℃保存,，避免反復冷凍,。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,，檢測前先離心或過濾,。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。