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技術(shù)文章

ELISA試劑盒延長反應(yīng)時間

閱讀:389          發(fā)布時間:2015-4-7

  ELISA試劑盒約40分鐘顯色達(dá),,隨即逐漸減弱,,至2小時后即可*消退至無色。TMB的終止液有多種,,疊氮鈉和十二烷基硫酸鈉(SDS)等酶抑制劑均可使反應(yīng)終止,。這類終止劑尚能使藍(lán)色維持較長時間(12-24小時)不褪,是目視判斷的良好終止劑,。此外,,各類酸性終止液則會使藍(lán)色轉(zhuǎn)變成黃色,此時可用特定的波長(450nm)測讀吸光值,。

     ELISA試劑盒實驗中顯色是ELISA試劑盒中的zui后一步溫育反應(yīng),,此時酶催化無色的底物生成有色的產(chǎn)物。反應(yīng)的溫度和時間仍是影響顯色的因素,。在一定時間內(nèi),,陰性孔可保持無色,,而陽性孔則隨時間的延長而呈色加強,。適當(dāng)提高溫度有助于加速顯色進(jìn)行,。在定量測定中,ELISA試劑盒加入底物后的反應(yīng)溫度和時間應(yīng)按規(guī)定力求準(zhǔn)確,。定性測定的顯色可在室溫進(jìn)行,,時間一般不需要嚴(yán)格控制,有時可根據(jù)陽性對照孔和陰性對照孔的顯色情況適當(dāng)縮短或,,及時判斷,。

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