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ELISA常用封鎖劑有：0.05%-0.5%的BSA,；10%的小牛血清或1%明膠；脫脂奶粉,，比較價(jià)廉,，可以高濃度使用（5%－10％）；還有一些稀有用到的各種動(dòng)物血清（主要為了排除相似蛋白干擾）和酪蛋白等等,。詳細(xì)的試驗(yàn)還要有堅(jiān)固的理論外也要實(shí)踐,，看一下*可不可以應(yīng)用到自己試驗(yàn)當(dāng)中去。但*選用什么,，要依據(jù)試驗(yàn)詳細(xì)來實(shí)踐,。應(yīng)留意以下原理：因?yàn)榈鞍踪|(zhì)與聚苯乙烯固相載體是通過物理吸附結(jié)合的，靠的是蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)上的疏水基團(tuán)與固相載體表面的疏水基團(tuán)間的作用,，這種物理吸附長短特異性的,，受蛋白質(zhì)的分子量、等電點(diǎn),、濃度等的影響,，大分子蛋白質(zhì)較小分子蛋白質(zhì)通常含有更多的疏水基團(tuán)，故更易吸附到固相載體表面,。小分子必需依賴和大的蛋白載體偶聯(lián)后才能固定在固相載體上,。還有有的包被原可能不是蛋白，對(duì)于生物素和脂類物質(zhì)或小分子物質(zhì)我們要事先對(duì)其改造再加以包被,，親和素生物素:先親和素先包被載體,，加入生物素化的DNA,，這種包被方法平均、牢固,，已擴(kuò)大應(yīng)用于各種抗原物質(zhì)的定量測定,。常用的包被液除了剛才提到的pH9.6碳酸鹽緩沖液，還有pH7.2的磷酸鹽緩沖液和pH7-8的Tris-HCL緩沖液等等,。
    包被原的性質(zhì)很重要,，蛋白濃度，是否降解,，這關(guān)系到你做出的抗體可不可以被其識(shí)別,，所以保留抗原很重要，我做重組蛋白時(shí),，師兄都嚴(yán)格警告我一定要在冰浴下緩慢融化就是這個(gè)道理,。封鎖就是讓大量不相關(guān)的蛋白質(zhì)充填這些曠地空閑，從而排斥ELISA后的步驟中干擾物質(zhì)的再吸附,。但有時(shí)因?yàn)樵囼?yàn)的需要,，包被原的特殊性也可能采用中性的緩沖溶液來包。