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撫生試劑-各項對照控制試驗條件

閱讀:213          發(fā)布時間:2014-6-13

                           各項對照控制試驗條件

其中包括:
(1) 固相載體的選擇:許多物質可作為固相載體,,如聚氯乙烯,、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等,。其形式可以是凹孔平板,、試管、珠粒等,。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板,。不管何種載體,在使用前均可進行篩選:用等量抗原包被,,在同一實驗條件下進行反應,,觀察其顯色反應是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好,。
(2) 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時,,要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0~9.6之間,。吸附溫度,時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃ 18~24小時,。蛋白質包被的zui適濃度需進行滴定:即用不同的蛋白質濃度(0.1,、1.0和10μg/ml等)進行包被后,在其它試驗條件相同時,,觀察陽性標本的OD值,。選擇OD值zui大而蛋白量zui少的濃度。對于多數(shù)蛋白質來說通常為1~10μg/ml,。
(3) 酶標記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進行初步效價的滴定(見酶標記抗體部份),。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實驗系統(tǒng)里準確地滴定其工作濃度,。

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