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夾心ELISA檢測(cè)與鑒定熱不穩(wěn)定腸毒素

  此法的包被物可用抗LT抗體或LT受體成分(GM神經(jīng)節(jié)背脂)兩種。試驗(yàn)時(shí),，先用1：5O稀釋的粗制兔抗LT血清或5O／lg／ml GM神經(jīng)節(jié)背脂包被塑料板,。包被后，加入待檢菌的37℃振搖培養(yǎng)18h的腦心浸液培養(yǎng)物濾液2OOμL,，每份樣品平行加2孔,，按常法溫育，洗滌后,，加1：500稀釋的粗制羊抗LT血清,，孵育，洗滌,，再加1：4OO的兔抗羊IgG堿性磷酸酶復(fù)合物,，以六水合物(hexahydrate)作底物顯色，測(cè)OD450值,，以O(shè)D450≥0．2O判為陽(yáng)性。據(jù)Klipstein等報(bào)道,，此法若以粗制LT血清為固相,，其檢測(cè)靈敏度為185pg／ml的LT；以GM作固相,，則可檢出290pg／m1,，且無假陽(yáng)性。

 

    除上法外,，有人已報(bào)道用GMl競(jìng)爭(zhēng)·ETISA檢測(cè)LT,；也有報(bào)道用雙夾心ELISA,，可用于檢測(cè)和定量豬源LT。