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撫生試劑-夾心ELISA檢測(cè)與鑒定熱不穩(wěn)定腸毒素
閱讀:155 發(fā)布時(shí)間:2014-5-8此法的包被物可用抗LT抗體或LT受體成分(GM神經(jīng)節(jié)背脂)兩種。試驗(yàn)時(shí),,先用1:5O稀釋的粗制兔抗LT血清或5O/lg/ml GM神經(jīng)節(jié)背脂包被塑料板,。包被后,加入待檢菌的37℃振搖培養(yǎng)18h的腦心浸液培養(yǎng)物濾液2OOμL,,每份樣品平行加2孔,,按常法溫育,洗滌后,,加1:500稀釋的粗制羊抗LT血清,,孵育,洗滌,,再加1:4OO的兔抗羊IgG堿性磷酸酶復(fù)合物,,以六水合物(hexahydrate)作底物顯色,測(cè)OD450值,,以O(shè)D450≥0.2O判為陽(yáng)性。據(jù)Klipstein等報(bào)道,,此法若以粗制LT血清為固相,,其檢測(cè)靈敏度為185pg/ml的LT;以GM作固相,,則可檢出290pg/m1,,且無假陽(yáng)性。
除上法外,,有人已報(bào)道用GMl競(jìng)爭(zhēng)·ETISA檢測(cè)LT,;也有報(bào)道用雙夾心ELISA,,可用于檢測(cè)和定量豬源LT。