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夾心ELISA檢測與鑒定熱不穩(wěn)定腸毒素

  此法的包被物可用抗LT抗體或LT受體成分(GM神經(jīng)節(jié)背脂)兩種,。試驗(yàn)時,，先用1：5O稀釋的粗制兔抗LT血清或5O／lg／ml GM神經(jīng)節(jié)背脂包被塑料板。包被后,，加入待檢菌的37℃振搖培養(yǎng)18h的腦心浸液培養(yǎng)物濾液2OOμL,，每份樣品平行加2孔，按常法溫育,，洗滌后,，加1：500稀釋的粗制羊抗LT血清，孵育,，洗滌,，再加1：4OO的兔抗羊IgG堿性磷酸酶復(fù)合物，以六水合物(hexahydrate)作底物顯色,，測OD450值,，以O(shè)D450≥0．2O判為陽性。據(jù)Klipstein等報道,，此法若以粗制LT血清為固相,，其檢測靈敏度為185pg／ml的LT；以GM作固相,，則可檢出290pg／m1,，且無假陽性。

 

    除上法外,，有人已報道用GMl競爭·ETISA檢測LT,；也有報道用雙夾心ELISA，可用于檢測和定量豬源LT,。