技術(shù)文章
促衰變因子(CD55)
閱讀:171 發(fā)布時(shí)間:2012-12-17促衰變因子(decay accelerating factor,DAF)是Nicholson-Weller等(1981)用正丁醇提取后,再以層析法從人和豚鼠紅細(xì)胞基質(zhì)中純化的一種膜蛋白,。因其具有促進(jìn)C3轉(zhuǎn)化酶衷變的活性故名,。經(jīng)在還原條件下做SDS-PAGE并以過碘酸-Schiff試劑染色表明,純化的DAF為單鏈膜糖蛋白,。人和豚鼠的DAF分了量不同分別為70kDa和60kDa?,F(xiàn)已按白細(xì)胞分化抗原將其歸為CD55。Davitz等(1986)通過用磷脂酰肌醇(PI)特異性的磷脂酶C(PI-PLC)處理人外周血細(xì)胞可釋放DAF的事實(shí)探明,,DAF是經(jīng)糖磷脂酰肌醇(glycosylphodphatidylinositol,GPI)錨而固定于細(xì)胞膜中的,。即糖蛋白的C末端共價(jià)結(jié)合于含PI的糖磷脂上,再經(jīng)PI插入細(xì)胞膜脂質(zhì)雙層的外層小葉中,。研究表明,,膜DAF的遷移率接近于膜類脂的遷移率,比大多數(shù)膜蛋白遷移率高一個(gè)數(shù)量級(jí),。認(rèn)為這有助于促進(jìn)數(shù)目有限的膜DAF分子與細(xì)胞表面大量的C3b或C4b片段接觸,。另外DAF的糖磷脂酰肌醇結(jié)構(gòu)還可能具有轉(zhuǎn)導(dǎo)細(xì)胞信號(hào)的作用。
除Nicholson-Weller等證實(shí)的分子量為70kDa的膜DAF外,,Kinoshita等(1987)用Western blotting在人紅細(xì)胞表面還檢出分子量為140kDa的一種膜DAF,,稱其為DAF-2。DAF-2在膜上的數(shù)目不足70kDa膜DAF的1/10,,但也有促進(jìn)C3b轉(zhuǎn)化酶衰變的活性,,也含有GPI錨結(jié)構(gòu)。由于DAF-2的分子量較70kDa的膜DAF大一倍,,提示其為膜DAF的二聚體,,但用二巰基乙醇或以SDS使基變性,都不能將DAF-2裂解成兩個(gè)成分,,故DAF-2的結(jié)構(gòu)仍有待進(jìn)一步闡明,。另外,近年應(yīng)用兩位點(diǎn)RIA測定法,,在血漿,、尿液、淚液,、唾液,、滑膜液和腦脊液,以及組織培養(yǎng)上清中均檢出可溶性的DAF(sDAF),,水平的40-400ng/ml范圍,。并發(fā)現(xiàn)尿液中的sDAF分子量略低于紅細(xì)胞上膜DAF的分子量,疏水性也較膜DAF小,,其抑制細(xì)胞表面C3轉(zhuǎn)化酶內(nèi)在裝配的活性較膜DAF約低100倍,,但仍具有促進(jìn)已形成的C3轉(zhuǎn)化酶衰變的作用,,效能類似于C4bp。
促衰變因子膜DAF廣泛分布于各種血細(xì)胞及其他各處的細(xì)胞上,,包括紅細(xì)胞,、粒細(xì)胞、單核細(xì)胞,、淋巴細(xì)胞(T,、B)、血小板,、骨髓單個(gè)核細(xì)胞,、紅細(xì)胞的始祖細(xì)胞,角膜,、結(jié)合膜,、消化道粘膜、外分泌腺,、腎小管,、膀胱,、子宮粘膜,、胞膜、心包及滑膜的上皮細(xì)胞,,精子,,以及培養(yǎng)的臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞上。但NK細(xì)胞上則缺如,。陣發(fā)性血紅蛋白尿(paroxysmal nocturnal hemohlobulinuria,PNH)病人的紅細(xì)胞上也缺少DAF,,并以缺乏程度將該病分為三個(gè)型。PNH病人的紅細(xì)胞對(duì)補(bǔ)體介導(dǎo)的溶血作用高度敏感,,就是由于紅細(xì)胞上缺乏DAF及基它含GPI錨的分子而引起的,。DAF帶有Cromer抗原。極少數(shù)稱之為Inaba或IFC缺乏的Cromer相關(guān)抗原的個(gè)體也缺乏DAF,。
促衰變因子DAF生物學(xué)活性及生理功能已虱到充分證實(shí),。它可保護(hù)宿主細(xì)胞免遭補(bǔ)體介導(dǎo)的溶解破壞。其作用機(jī)理是,,DAF不僅可阻止經(jīng)典或替代途徑C3和C5轉(zhuǎn)化酶的裝配,,并且可通過誘導(dǎo)催化單位C2a或Bb的快速解離而使已形成的C4、C5轉(zhuǎn)化酶失去穩(wěn)定性,,從而抑制補(bǔ)體攻擊單位的活化(圖5-15),。DAF的這種抑制作用于直接結(jié)合在細(xì)胞上的C3、C5轉(zhuǎn)化酶,,也即DAF不抑制靶細(xì)胞上正常的補(bǔ)體激活劑如微生物和免疫復(fù)合物,。但DAF不能作為I因子裂解C3b和C4b的輔因子而發(fā)揮作用,。另外,DAF雖不能阻止C2和B因子(分別通過與C4b或C3b結(jié)合)與細(xì)胞的zui初結(jié)合,,但卻可使C2a或Bb由它們結(jié)合的部位解離出來,,以而阻止C3轉(zhuǎn)化酶的裝配。