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技術(shù)文章

現(xiàn)貨供應(yīng)人α-銀環(huán)蛇毒素(α-BGT)ELISA試劑盒使用說(shuō)明書

閱讀:495          發(fā)布時(shí)間:2012-8-6

人α-銀環(huán)蛇毒素(α-BGT)ELISA試劑盒使用說(shuō)明書
  本試劑盒僅供研究使用。
藥品名稱:
通用名:人α-銀環(huán)蛇毒素(α-BGT)酶聯(lián)免疫分析試劑盒
使用目的:
   本試劑盒用于測(cè)定人血清,,血漿及相關(guān)液體樣本中α-銀環(huán)蛇毒素(α-BGT)含量,。
實(shí)驗(yàn)原理
   本試劑盒應(yīng)用間接法測(cè)定標(biāo)本中人α-銀環(huán)蛇毒素(α-BGT)水平。用純化的人α-銀環(huán)蛇毒素(α-BGT)抗體包被微孔板,,制成固相抗體,,往包被單抗的微孔中依次加入已知濃度的α-銀環(huán)蛇毒素(α-BGT)標(biāo)準(zhǔn)品和未知濃度的α-BGT待檢樣品,溫育后,,加入生物素標(biāo)記的抗IgG抗體,,再與鏈霉親和素-HRP結(jié)合,形成免疫復(fù)合物,,經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物TMB顯色,。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的α-銀環(huán)蛇毒素(α-BGT)呈正相關(guān),。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),,通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中人α-銀環(huán)蛇毒素(α-BGT)濃度。
試劑盒組成
1 20倍濃縮洗滌液 50ml×1瓶  
 
人α-銀環(huán)蛇毒素(α-BGT)ELISA試劑盒使用說(shuō)明書
9 標(biāo)準(zhǔn)品S1(180 ng/L) 0.5ml×1瓶
2 鏈霉親和素-HRP 6ml×1瓶  標(biāo)準(zhǔn)品S2(120 ng/L) 0.5ml×1瓶
3 酶標(biāo)包被板 12孔×8條  標(biāo)準(zhǔn)品S3(60 ng/L) 0.5ml×1瓶
4 生物素標(biāo)記的抗-IgG抗體 6ml×1瓶  標(biāo)準(zhǔn)品S4(30 ng/L) 0.5ml×1瓶
5 顯色劑A液 6ml×1瓶  標(biāo)準(zhǔn)品S5(15ng/L) 0.5ml×1瓶 
6 顯色劑B液 6ml×1/瓶 10 密封袋 1個(gè)
7 終止液 6ml×1瓶 11 封板膜 3張
8 樣品稀釋液 6ml×1瓶 12 說(shuō)明書 1份
 
標(biāo)本要求
1.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,,因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性,。
2.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn),。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
操作步驟
1.根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來(lái)定,,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔,。
2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品,其余各步操作相同),、標(biāo)準(zhǔn)品孔,、待測(cè)樣品孔。然后在標(biāo)準(zhǔn)品孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品50μl,,在樣本反應(yīng)孔中先加入待測(cè)樣品10μl再加入樣品稀釋液40μl(樣品zui終稀釋度為5倍),,蓋上封板膜,輕輕振蕩混勻,,37℃溫育45分鐘,。
3. 配液:將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用
4. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,,甩干,,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,,如此重復(fù)4次,,拍干。
5. 加生物素標(biāo)記的抗-IgG抗體:每孔加入生物素標(biāo)記的抗-IgG抗體50μl,。37℃溫育30分鐘
6. 洗滌:操作同4,。
7.加鏈霉親和素-HRP:每孔加入50μl的鏈酶親和素-HRP,輕輕振蕩混勻,,37℃溫育30分鐘,。
8. 洗滌:操作同4。
9.顯色:每孔先加入顯色劑A 50μl,再加入顯色劑B 50μl,,輕輕震蕩混勻,,37℃避光顯色15分鐘.
10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色),。
11.測(cè)定:以空白空調(diào)零,,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行,。
 
計(jì)算
    以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),,OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度,;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,,將樣品的OD值待入方程式,計(jì)算出樣品濃度,,再乘以稀釋倍數(shù),,即為樣品的實(shí)際濃度。
注意事項(xiàng)
人α-銀環(huán)蛇毒素(α-BGT)ELISA試劑盒使用說(shuō)明書
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi),,如標(biāo)本數(shù)量多,,推薦使用排槍加樣。
4.  如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值),,請(qǐng)先將樣本稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,,計(jì)算時(shí)請(qǐng)zui后乘以稀釋倍數(shù)(×5×n)。
5.  封板膜只限一次性使用,,以避免交叉污染,。
6.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。顯色劑B請(qǐng)避光保存,。
7.嚴(yán)格按照說(shuō)明書的操作進(jìn)行,,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9. 如與英文說(shuō)明書有異,,以英文說(shuō)明書為準(zhǔn),。
線形范圍:
  10ng/L-200ng/L
規(guī)格:
  96人份/盒
保存條件及有效期
1.試劑盒保存:;2-8℃,。
2.有效期:6個(gè)月
小鼠脫氧吡啶酚/脫氧吡啶啉(DPD)ELISA試劑盒
小鼠吡啶交聯(lián)物(PY)ELISA試劑盒
小鼠骨橋素(OPN)ELISA試劑盒
小鼠促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)ELISA試劑盒
小鼠骨特異性堿性磷酸酶B(ALP-B)ELISA試劑盒
小鼠轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR/CD71)ELISA試劑盒
小鼠半胱氨酸蛋白酶抑制劑/胱抑素C(Cys-C)ELISA試劑盒
小鼠第八因子相關(guān)抗原(FⅧAg)ELISA試劑盒
小鼠丙酮酸激酶M2型同工酶(M2-PK)ELISA試劑盒
小鼠催乳素(PRL)ELISA試劑盒
小鼠抵抗素(Resistin)ELISA試劑盒
小鼠乙酰膽堿受體抗體(AChRab)ELISA試劑盒
小鼠骨鈣素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)ELISA試劑盒
 

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