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雞酸性磷酸酶（ACP）酶聯(lián)免疫分析(ELISA)試劑盒用于測定雞血清、血漿及相關液體樣本中酸性磷酸酶（ACP）含量,。

實驗原理：

本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中雞酸性磷酸酶（ACP）水平,。用純化的雞酸性磷酸酶（ACP）抗體包被微孔板，制成固相抗體,，往包被單抗的微孔中依次加入酸性磷酸酶（ACP）,，再與HRP標記的酸性磷酸酶（ACP）抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,，經(jīng)過徹di洗滌后加底物TMB顯色,。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的酸性磷酸酶（ACP）呈正相關,。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中雞酸性磷酸酶（ACP）濃度,。

樣本處理及要求：

1. 血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘,，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清,，保存過程中如出現(xiàn)沉淀,，應再次離心,。

2. 血漿：應根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后,，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）,。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成,，應該再次離心,。

3. 尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）,。仔細收集上清,，保存過程中如有沉淀形成，應再次離心,。胸腹水,、腦脊液參照實行。

4. 細胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時,，用無菌管收集,。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清,。檢測細胞內(nèi)的成份時,，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右,。通過反復凍融,，以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）,。仔細收集上清,。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心,。

5. 組織標本：切割標本后,，稱取重量。加入一定量的PBS,，PH7.4,。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐３?-8℃的溫度,。加入一定量的PBS（PH7.4）,，用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）,。仔細收集上清,。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。

6. 標本采集后盡早進行提取,，提取按相關文獻進行,，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,，可將標本放于-20℃保存,，但應避免反復凍融.

7. 不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性,。

※注意：血清血漿樣本避免使用溶血,、高血脂樣本,，以免影響檢測結果,；如果樣本中的靶標物檢測濃度高于標準品的最高值，請將樣品做適當倍數(shù)稀釋后檢測,，建議正式實驗前做預實驗以確定稀釋倍數(shù),。