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現(xiàn)貨人血管內(nèi)皮生長因子VEGFELISA試劑盒南通,無錫
閱讀：224 發(fā)布時間：2012-4-28 人血管內(nèi)皮生長因子VEGFELISA試劑盒南通,無錫
本試劑僅供研究使用 標本：細胞培養(yǎng)上清液
一,、試 劑 組 成
1,、精密度微孔板Microtest Plates 96 wells 2、酶標偶合液Enzyme Conjugate 12.0ml
3,、標準品Standard 5 x 1.0ml 4,、呈色劑A、Substrate A 6.0ml
5,、呈色劑B,、Substrate B 6.0ml 6、終止液Stop Solution 6.0ml
7,、濃縮洗滌液（1：20）Rinsing Buffer 60.0ml 8,、5倍樣品稀釋液 dilution 15.0m
人血管內(nèi)皮生長因子VEGFELISA試劑盒南通,無錫 二、注意事項
1. 此試劑為體外檢測試劑,，效期內(nèi)使用,，試劑應視為傳染物，不同總批號的試劑不能混用,。
使用前應將盒內(nèi)各試劑取出,。室溫放置至少30分鐘，
濃縮洗滌液出現(xiàn)結(jié)晶后,，請于37℃孵育15分鐘,。
濃縮樣品稀釋液出現(xiàn)結(jié)晶后,，請于37℃孵育15分鐘
若24小時內(nèi)進行實驗，標本可存放于2～8℃,。不需及時實驗,，標本-20℃保存，避免反復凍融,。
在沖洗微孔板過程中,，務必反復清洗干凈，并扣干微孔中的殘余液體,，否則將降低度,，造成吸光度偏離的假像。
加樣完畢后,，應注意輕微搖動微孔反應條,，以便使孔中的液體充分混勻。
試劑盒保存于2～8℃,，請勿冷凍,，有效期請見盒內(nèi)標示。
人血管內(nèi)皮生長因子VEGFELISA試劑盒南通,無錫 三,、實驗前準備
1．使用前應將盒內(nèi)各試劑取出，室溫放置至少30分鐘,。
2．準備各種實驗儀器及材料,，如微量移液器，吸頭,，醫(yī)用蒸餾水等
3．濃縮洗液與醫(yī)用蒸餾水1︰19倍稀釋后成為應用洗滌液
4．濃縮樣品稀釋液與醫(yī)用蒸餾水1︰4倍稀釋成應用樣品稀釋液
5．用應用樣品稀釋液來稀釋樣品,，按照1：100的體積比來稀釋樣品如10μl的樣品加入到1ml的應用樣品稀釋液中，充分混勻待用,。）
四,、操 作 步 驟
1．取出酶標板，設空白孔,，依照次序?qū)謩e加入100μl的標準品于空白微孔中（空白孔視為0號標準品,，用醫(yī)用蒸餾水替代）
2、分別標記樣品編號,，加入100μl的稀釋樣品于空白微孔中（不同的樣本采用不同的吸頭）,。
3、將酶標板置于37℃溫育30分鐘,；
4,、將酶標板板取出，將其中的液體甩去,，每個孔中全部加滿應用洗滌液后,，立即甩去液體;
5,、每個孔中加滿應用洗滌液后，輕微振搖酶標板30秒后將孔中的應用洗滌液甩去,，在吸水紙上將酶標板拍干,。
6、重復第5個步驟5次,，在吸水紙上將酶標板拍干,。
7、在標準品孔和樣品孔中加入100μl的酶標偶合溶液,。
8,、將96孔板置于37℃溫育30分鐘。
9,、將酶標板取出,，將其中的液體甩去，每個孔中全部加滿應用洗滌液后,，立即甩去液體,。
10、每個孔中再次加滿洗滌應用液后,，室溫輕微振搖酶標板30秒后將孔中的應用洗滌液甩去,，在吸水紙上將酶標板拍干。
11,、重復第5個步驟5次,，在吸水紙上將酶標板拍干。
12,、在每個孔中加入底物A 50μl后立即加入底物B 50μl,。輕輕振蕩混勻。（A液,、B液采用不同的吸頭加樣）
13,、將酶標板置于37℃避光溫育反應15分鐘。
14,、每個微孔中加入50μl的終止液,，輕輕振蕩混勻。
15,、在酶標儀上,，450nm處測定OD; 顯色后，15分鐘內(nèi)進行測定,。
16,、根據(jù)制備的標準曲線，計算樣本含量
五,、結(jié) 果 判 斷
儀器值：于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值,。
檢測值范圍：0 – 32ng/ml
敏感度： 0.2 ng/ml
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