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各種細(xì)胞培養(yǎng)基類型概述
閱讀：114 發(fā)布時間：2024-5-6細(xì)胞培養(yǎng)基既是培養(yǎng)細(xì)胞中供給細(xì)胞營養(yǎng)和促使細(xì)胞生殖增殖的基礎(chǔ)物質(zhì),，也是培養(yǎng)細(xì)胞生長和繁殖的生存環(huán)境。常見的種類如下：
1,、無機(jī)鹽
培養(yǎng)液中無機(jī)鹽的主要功能是幫助細(xì)胞維持滲透壓平衡,。此外，通過提供鈉,，鉀和鈣離子,，幫助細(xì)胞調(diào)節(jié)細(xì)胞膜功能,。
培養(yǎng)液的滲透壓是一個非常重要的因素， 細(xì)胞通?？赡褪?60mOsm/kg 320 mOsm/kg,。標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)液的滲透壓在此范圍內(nèi)波動。
特別注意：向培養(yǎng)液中加入其它物質(zhì)有可能會明顯改變培養(yǎng)液的滲透壓,，特別是溶于強(qiáng)酸或強(qiáng)堿中的物質(zhì),。向培養(yǎng)液中添加HEPES時需按以下方法調(diào)節(jié)鈉離子濃度。
2,、 氨基酸
氨基酸是組成蛋白質(zhì)的基本單位,，不同種類的細(xì)胞對氨基酸的要求各異，但有幾種氨基酸細(xì)胞自身不能合成,，必須依靠培養(yǎng)液提供,，這幾種氨基酸稱為必需氨基酸。
其中谷氨酰胺是細(xì)胞合成核酸和蛋白質(zhì)必需的氨基酸,，在缺少谷氨酰胺時,，細(xì)胞生長不良而死亡。因此,，各種培養(yǎng)液中都有較大量的谷氨酰胺,。
但由于谷氨酰胺在溶液中很不穩(wěn)定，應(yīng)置于-20℃冰箱中保存,，在使用前加入培養(yǎng)液內(nèi),。已含谷氨酰胺的培養(yǎng)液在4℃冰箱中儲存2周以上時，還應(yīng)重新加入原來量的谷氨酰胺,。
3,、碳水化合物
碳水化合物是細(xì)胞生長主要能量來源，其中有的是合成蛋白質(zhì)和核酸的成分,。主要有葡萄糖,，核糖，脫氧核糖,，丙酮酸鈉和醋酸等,。
4、維生素
在細(xì)胞培養(yǎng)中,，盡管血清是維生素重要來源,， 但是許多培養(yǎng)基中添加了各種維生素以適合更多的細(xì)胞系生長。
5,、緩沖系統(tǒng)
大多數(shù)細(xì)胞所需pH 在 7.2 - 7.4。但細(xì)胞培養(yǎng)適pH值隨培養(yǎng)的細(xì)胞種類不同而不同,。成纖維細(xì)胞喜歡較高pH （7.4 - 7.7）,， 而傳代轉(zhuǎn)化細(xì)胞系則需要偏酸pH （7.0 - 7.4）,。由于多數(shù)培養(yǎng)液靠碳酸氫鈉（NaHCO3）與CO2體系進(jìn)行緩沖，因此氣相中的CO2濃度應(yīng)與培養(yǎng)液中碳酸氫鈉濃度相平衡,。
如果氣相或培養(yǎng)箱空氣中CO2濃度設(shè)定在5%,，培養(yǎng)液中NaHCO3的加入量為1。97g/L;如果CO2濃度維持在10%,，培養(yǎng)液中NaHCO3的加入量為3,。95g/L。
細(xì)胞培養(yǎng)瓶蓋不應(yīng)擰得太緊,，以保證氣體交換,。 HEPES 是一種非離子緩沖液，在pH 7.2 - 7.4 范圍內(nèi)具有較好的緩沖能力,，但是非常昂貴,，在高濃度時對一些細(xì)胞可能有毒。HEPES緩沖液可與低水平的碳酸鈉（0.34g/L）共用,，以抵消因額外加入HEPES引起的滲透壓增加,。
在這種培養(yǎng)條件下，細(xì)胞培養(yǎng)瓶的蓋子應(yīng)擰緊,，以防止培養(yǎng)液中所需的少量碳酸鹽散入空氣中,，大多數(shù)培養(yǎng)液中含有酚紅作為pH指示劑，酸性培養(yǎng)液呈橙黃色,，堿性培養(yǎng)液呈深紅色,。
6、 其它成分
在一些較為復(fù)雜的培養(yǎng)液中還包括其它一些成分,。如在雜交瘤技術(shù)中常用的DMEM培養(yǎng)液,，使用時還需要補(bǔ)加丙酮酸鈉和2-巰乙醇（2-Mercaptoethanol，2-Me）,。
2-Me 對細(xì)胞生長有很重要的作用,。有人認(rèn)為它相當(dāng)于胎牛血清，有直接刺激細(xì)胞增殖作用,。2-Me的活性部分是硫氫基,，其中一個重要作用是使血清中含硫的化合物還原成谷胱甘肽，能誘導(dǎo)細(xì)胞的增殖,，為非特異性的激活作用,。
同時避免過氧化物對培養(yǎng)細(xì)胞的損害。另一個重要作用是促進(jìn)分裂原的反應(yīng)和DNA合成,，增加植物凝集素（PHA）對淋巴細(xì)胞的轉(zhuǎn)化作用,，已廣泛應(yīng)用于雜交瘤技術(shù)，另外,，也開始用于一些難以培養(yǎng)的細(xì)胞,。2-Me是一種小分子還原劑,，極易氧化。
分子量為78.13,，純的2-Me是一種無色有刺激味的液體,，比重為1.110-1.120（Do20），常用終濃度為5×10-5M,，常配制成0.1M的儲存液,，用時每升培養(yǎng)液加0.5ml。