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    酶聯(lián)免疫吸附試驗（enzymelinkedimmunosorbentassay，ELISA）指將可溶性的抗原或抗體結(jié)合到聚苯y(tǒng)i烯等固相載體上,，利用抗原抗體結(jié)合專一性進行免疫反應(yīng)的定性和定量檢測方法,。它是應(yīng)用最多的一種免疫酶技術(shù)。ELISA試劑盒（ELISAKits）已成為藥物和植物病理學(xué)研究中的常用診斷工具,，是檢測組織提取液,、血清和細胞培養(yǎng)液中目標(biāo)抗體/抗原的理想工具,，也是重要的質(zhì)量控制手段。

   通常我們可用于ELISA檢測的樣本是有多種類型的,，如血清,、血漿、尿液,、細胞培養(yǎng)上清或組織勻漿液等,，不同類型的檢測樣本前期的處理方法是不一樣的。正確的處理樣本是保證ELISA檢測的正確性和準(zhǔn)確性的第一步,，下面介紹一下血清樣本的處理方法,。血清是常用于ELISA檢測的一類樣本，處理也比較簡單,。

   用無熱原,、無內(nèi)毒素的試管或離心管采集血液標(biāo)本，將試管或離心管室溫放置2小時或4℃過夜,，使血清析出,。（最好將試管或離心管傾斜放置，使液面橫截面增大,，能使血清更大程度的析出,。）4℃ 1000×g離心20分鐘，仔細收集上清,。建議將血清分裝多份,，-20℃或-80℃保存，避免反復(fù)凍融,。

   采血過程中應(yīng)避免溶血,，因為紅細胞裂解時會釋放具有過氧化酶活性的物質(zhì)，在以HRP為標(biāo)記的ELISA檢測中會有非特異性的顯色,，而導(dǎo)致檢測的不準(zhǔn)確性,。同時也應(yīng)避免細菌污染，因為菌體內(nèi)可能含有內(nèi)源性的HRP從而導(dǎo)致檢測的假陽性,。

ELISA 實驗中血清的采集,、處理和保存：

1、真空采血針采集 2ml 新鮮血液,，加入無菌試管中,；

2、采血后室溫靜置 1 小時,；

3,、將采集血液用離心機 4℃，2500rpm 離心 10min，,，將離心好的勻漿留上清,，棄下面沉淀。

4,、取上清,。 分裝凍存?zhèn)溆茫?/p>

2-8℃下，可放置保存 24-48 小時,；

-20℃下,，可放置保存 1 個月；

-70℃下,，可放置保存 6 個月,；

5、根據(jù)你的實驗需要,，取適量上清夜進行各種 ELISA 測定,。

大部分 ELISA 檢測均以血清為標(biāo)本。血清標(biāo)本可按常規(guī)方法采集,，應(yīng)注意避免溶血,，紅細胞溶解時會釋放出具有過氧化物酶活性的物質(zhì)，以 HRP 為標(biāo)記的 ELISA 測定中,，溶血標(biāo)本可能會增加非特異性顯色,。此外還應(yīng)避免細菌污染，因為菌體中可能含有含有內(nèi)源性 HRP,，也會產(chǎn)生假陽性反應(yīng),。血清標(biāo)本宜在新鮮 時檢測。如在冰箱中保存過久,，其中的可發(fā)生聚合,，間接法 ELISA 中可使本底加深。