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ELISA實(shí)驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)品正確溶解與稀釋
閱讀:426 發(fā)布時(shí)間:2023-11-28ELISA標(biāo)準(zhǔn)曲線是結(jié)果計(jì)算的尺子,,標(biāo)準(zhǔn)品是ELISA 實(shí)驗(yàn)成功與否的關(guān)鍵點(diǎn),。
標(biāo)準(zhǔn)品正確溶解:
1. 粉末標(biāo)準(zhǔn)品短暫離心,,讓因運(yùn)輸沾到管蓋、管壁的標(biāo)準(zhǔn)品沉到管底,。
2. 根據(jù)瓶標(biāo)簽加入一定體積的蒸餾水,,加水后輕柔渦旋震蕩,室溫靜置溶解 10-30min,,讓粉末全溶解,。
注意:加水后暫不用移液槍吹吸,避免蛋白未溶解,,槍頭帶出部分蛋白,,待全溶解后可吹吸或渦旋振蕩混勻。
標(biāo)準(zhǔn)品梯度稀釋:
1,、標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液的選擇:
若血清,、血漿、組織勻漿樣本,,用試劑盒中的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液,,梯度稀釋標(biāo)準(zhǔn)品,。
若細(xì)胞上清樣本,建議用細(xì)胞培養(yǎng)基梯度稀釋標(biāo)準(zhǔn)品,。
2,、耗材準(zhǔn)備:準(zhǔn)備8個(gè)1.5Ml離心管,寫(xiě)上S1-S7,、空白,。
3、梯度稀釋:根據(jù)說(shuō)明書(shū),,每管加入等體積的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液(培養(yǎng)基),。吸取同體積溶解好的標(biāo)準(zhǔn)品到S1管中,吹打10次混勻,,渦旋5S,。從S1管中吸取同體積溶液到 S2管,吹打10次混勻,,渦旋5s,。同法稀釋S3-S7濃度。
4,、空白: 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液(培養(yǎng)基)作為空白即零濃度,。
注意:梯度稀釋標(biāo)準(zhǔn)品時(shí),渦旋震蕩混勻后可短暫離心,,讓到蓋子,、壁上的液體到管底,再開(kāi)始稀釋下個(gè)濃度,。