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ELISA試驗陰性與陽性對照平均值計算與判斷
閱讀：1213 發(fā)布時間：2023-11-20陰性與陽性對照平均值計算與判斷：
1．陰性對照平均值NCx有效性計算判斷舉例：
（1）第一類NCx計算與評價：以HBsAg為例
Ⅰ. 設置3孔的NCx計算：NCx=（0.011+0.010+0.090）/3=0.010
Ⅱ. 任一個NC值應≤0.100至≥－0.010,；
Ⅲ. 各NC值也應介于≥0.5×NCx至≤1.5×NCx之間。此時各孔的NC值均處于NCx±0.006范圍內,，其中遇有一孔NC值偏離該范圍時,，則棄去該NC值，再計算NCx,。如有2孔NC值超出該范圍時,，本次試驗（無效）應予復試。
Ⅳ. 不同廠牌對NCx的具體要求略有不同,，但總的原則幾為一致,，如<法>巴斯德HBsAg EIA Kit。
（2）第二類NCx計算與評價：可包括抗—HBc,、抗—HBe,。以抗—HBc、抗—HBe為例：
Ⅰ. 取3孔陰性對照A值的平均值：
抗—HBc NCx=（1.027+0.989+1.278）/3=1.065
抗—HBe NCx=（1.169+1.088+0.993）/3=1.083,；
請各位注意：這2個NCx是不是很接近1.00呀,？也就是說，十分接近C.O.I.（C.O./S,，或C.O./A）=1.00,！這不是一種偶然，而是國際試劑（如雅培）的“質量"標志。如果偏大,，例如1.50以上,，或者偏小，0.50以下,，待檢樣本中會導致出現(xiàn)什么現(xiàn)象呢,？請讀者自己思考吧。
Ⅱ. 各孔NC值均應＜2.000,，并處于≥0.5×NCx至≤1.5×NCx之間,。若其中1孔NC值偏離該范圍時，棄去,，再計算2孔的NC值的NCx,。如有2孔NC值偏離該范圍時，應重新試驗,。2．陽性對照平均值PCx有效性計算與評價也分為兩類：
（1）第一類 PCx計算與評價：以HBsAg為例 DauI*sZmR
Ⅰ. 第一類PCx的計算不列入Cut off計算,，可取（設）2—3孔陽性對照的平均值PCx（Abbott）： PCx=（1.024+1.030）/2=1.027,。注意：本例雅培試劑HBsAg的Cutoff值=NCx+0.05=0.06,，PCx 的S/C.O.=1.027/0.06=17.12。如果S/C.O.超過20.00以上,，提示HBsAg陽性對照含量太高,！
Ⅱ. 參照方法學的要求，也可規(guī)定PCx應≥1.000（指A值）,，而且各孔PC值要求≥0.5×PCx 至≤1.5×PCx
Ⅲ. PC的設置及PCx的計算,，主要用于評價本次試驗結果是否有效和各批/次試驗結果的穩(wěn)定性和可比性，并不參與Cut off值的計算,。同一個批號試劑及其陽性對照品在規(guī)定保存條件和有效期內,，各次試驗時PCx值也應保持相對穩(wěn)定水平。換句話說,，實驗結果有效性評價時,，也應觀測陽性對照的“統(tǒng)計過程控制"（SPC）處于穩(wěn)定狀態(tài)—輸出“控制圖"。
（2）第二類PCx的計算與評價：也以抗—HBc為例
Ⅰ. 可?。ㄔO）2—3孔PC 的A值得平均值PCx： PCx=（0.051+0.038）/2=0.045
Ⅱ. 參照方法學要求,，也可規(guī)定各孔PC值應處于≥0.5×PCx 至≤1.5×PCx范圍內。
Ⅲ. PCx值參與Cut off值的計算,，例如抗—HBc的Cut off（Abbott）：
Cut off=0.4（NCx）+0.6（PCx）,。
該值（Cut off）可以理解為：指示性定量HBcAg反應值的40%加定量抗—HBc反應值的60%之和，恰為健康人群血中抗—HBc正常值范圍的界限,。任一待檢樣本的檢出值低于該Cut off值時則判為抗—HBc陽性,，大于該Cut off值時則判為抗—HBc陰性,。