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ELISA實(shí)驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)品溶解與稀釋介紹

閱讀:227          發(fā)布時(shí)間:2023-11-6

       ELISA是酶聯(lián)接免疫吸附劑測(cè)定( Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay )的簡(jiǎn)稱,是一種檢測(cè)方法,,而標(biāo)準(zhǔn)品是相對(duì)于具體的物質(zhì)有具體的標(biāo)準(zhǔn)品,,所以不存在說(shuō)ELISA的標(biāo)準(zhǔn)品。ELISA標(biāo)準(zhǔn)曲線是結(jié)果計(jì)算的尺子,,標(biāo)準(zhǔn)品是ELISA 實(shí)驗(yàn)成功與否的關(guān)鍵點(diǎn),。


正確溶解、稀釋標(biāo)準(zhǔn)品如下:

 

1. 粉末標(biāo)準(zhǔn)品短暫離心,,讓因運(yùn)輸沾到管蓋,、管壁的標(biāo)準(zhǔn)品沉到管底。

 

2. 根據(jù)瓶標(biāo)簽加入一定體積的蒸餾水,,加水后輕柔渦旋震蕩,,室溫靜置溶解 10-30min,讓粉末*溶解,。

注意:加水后暫不用移液槍吹吸,,避免蛋白未溶解,槍頭帶出部分蛋白,,待*溶解后可吹吸或渦旋振蕩混勻。

 

3. 標(biāo)準(zhǔn)品梯度稀釋:

(1)標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液的選擇:

若血清,、血漿,、組織勻漿樣本,用試劑盒中的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液,,梯度稀釋標(biāo)準(zhǔn)品,。

若細(xì)胞上清樣本,建議用細(xì)胞培養(yǎng)基梯度稀釋標(biāo)準(zhǔn)品,。

(2)耗材準(zhǔn)備:準(zhǔn)備8個(gè)1.5Ml離心管,,寫(xiě)上S1-S7、空白,。

(3)梯度稀釋:根據(jù)說(shuō)明書(shū),,每管加入等體積的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液(培養(yǎng)基)。吸取同體積溶解好的標(biāo)準(zhǔn)品到S1管中,,吹打10次混勻,,渦旋5S。從S1管中吸取同體積溶液到 S2管,吹打10次混勻,,渦旋5s,。同法稀釋S3-S7濃度。

(4)空白: 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液(培養(yǎng)基)作為空白即零濃度,。

注意:梯度稀釋標(biāo)準(zhǔn)品時(shí),,渦旋震蕩混勻后可短暫離心,讓到蓋子,、壁上的液體到管底,再開(kāi)始稀釋下個(gè)濃度,。

 


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