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       目前,，血清仍是動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)中最基本的的添加物,，尤其是在原代培養(yǎng)或者細(xì)胞生長(zhǎng)狀況不良時(shí)，常常會(huì)先使用有血清的培養(yǎng)液進(jìn)行培養(yǎng)，待細(xì)胞生長(zhǎng)旺盛以后,，再換成無(wú)血清培養(yǎng)液,。細(xì)胞轉(zhuǎn)入無(wú)血清培養(yǎng)基培養(yǎng)要有一個(gè)適應(yīng)過(guò)程，一般要逐步降低血清濃度,，從10%減少到5%,，3%，1%,，直至無(wú)血清培養(yǎng),。在降低過(guò)程中要注意觀察細(xì)胞形態(tài)是否發(fā)生變化，是否有部分細(xì)胞死亡,，存活細(xì)胞是否還保持原有的功能和生物學(xué)特性等,。在實(shí)驗(yàn)后這些細(xì)胞一般不再繼續(xù)保留，很少有細(xì)胞能夠長(zhǎng)期培養(yǎng)于無(wú)血清培養(yǎng)基而不發(fā)生改變的,。細(xì)胞轉(zhuǎn)入無(wú)血清培養(yǎng)之前,，要留有種子細(xì)胞，種子細(xì)胞按常規(guī)培養(yǎng)于含血清的培養(yǎng)基中,，以保證細(xì)胞的特性不發(fā)生變化,。

    為了使細(xì)胞適應(yīng)無(wú)血清培養(yǎng)，關(guān)鍵的是使所培養(yǎng)細(xì)胞：

    1.處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)中期

    2.>90%活細(xì)胞率

    3.適應(yīng)時(shí)以較高的起始細(xì)胞接種

    細(xì)胞適應(yīng)無(wú)血清培養(yǎng)基的方式：

    1. 直接適應(yīng)——細(xì)胞從添加血清的培養(yǎng)基轉(zhuǎn)換到無(wú)血清培養(yǎng)基（SFM）中,。

    一些類(lèi)型細(xì)胞可直接從包含血清的培養(yǎng)基適應(yīng)無(wú)血清培養(yǎng)基,。對(duì)于直接適應(yīng)，接種細(xì)胞密度應(yīng)該:2.5×105~3.5×105細(xì)胞/ml,。當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到1×106~3×106細(xì)胞/ml時(shí),，傳代培養(yǎng)細(xì)胞。當(dāng)細(xì)胞密度在培養(yǎng)4到7天后達(dá)到2×106~4×106細(xì)胞/ml時(shí),，細(xì)胞wan全適應(yīng)了無(wú)血清培養(yǎng)基,。每隔3~5天，當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到1×106~3×106細(xì)胞/ml,，細(xì)胞活率在90％時(shí),，貯備的適應(yīng)了無(wú)血清培養(yǎng)基的細(xì)胞培養(yǎng)物應(yīng)該再次傳代培養(yǎng)。

    2. 連續(xù)適應(yīng)——分好幾步把細(xì)胞從添加血清的培養(yǎng)基轉(zhuǎn)換到無(wú)血清培養(yǎng)基（SFM）中,，與直接適應(yīng)相比較,，連續(xù)適應(yīng)趨向?qū)τ诩?xì)胞更加溫和一些。

    （1）,、以2倍正常接種密度接種生長(zhǎng)活躍的細(xì)胞培養(yǎng)物到75%有血清培養(yǎng)基：25％SFM混合培養(yǎng)基中,，傳代培養(yǎng)。

    （2）,、當(dāng)細(xì)胞密度>5×105細(xì)胞/ml時(shí),，以2×105到3×105細(xì)胞/ml細(xì)胞密度,，在有血清培養(yǎng)基：SFM為50∶50的混合培養(yǎng)基中傳代培養(yǎng)。

    （3）,、以2×106到3×106細(xì)胞/ml細(xì)胞密度,，25％有血清培養(yǎng)基和75%SFM中傳代培養(yǎng)。

    （4）,、當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到1×106到3×106細(xì)胞/ml（接種后4到6天）,，在100％SFM培養(yǎng)基中傳代培養(yǎng)。

    （5）,、每隔3到5天,，當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到1×106到3×106細(xì)胞/ml，細(xì)胞活率在90％時(shí),，貯備的適應(yīng)了無(wú)血清培養(yǎng)基的細(xì)胞培養(yǎng)物應(yīng)該再次傳代培養(yǎng),。

    建議備份前一次混合培養(yǎng)的培養(yǎng)物，直到每一次細(xì)胞適應(yīng)了新的混合培養(yǎng)基,。每一次減少血清前,，可能需要在SFM/有血清混合培養(yǎng)基中進(jìn)行幾次傳代。

    在適應(yīng)過(guò)程中,，不要讓細(xì)胞生長(zhǎng)過(guò)度,。這將增加選擇亞群的可能性。需要注意,，與有血清培養(yǎng)基相比,，大部分SFM包含非常少的蛋白質(zhì)，因而更易于受外界因素的影響,。