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技術(shù)文章

ELISA標準品溶解稀釋操作要點

閱讀:367          發(fā)布時間:2023-10-3

ELISA標準曲線是結(jié)果計算的尺子,,標準品是ELISA 實驗成功與否的關(guān)鍵點,。標準品,即是標準物品,,作為一種衡量標準,,如果用在藥物方面,則為含量測定中的標準含量,。正確溶解,、稀釋標準品操作下面詳述:

1. 粉末標準品短暫離心,讓因運輸沾到管蓋,、管壁的標準品沉到管底,。

2. 根據(jù)瓶標簽加入一定體積的蒸餾水,加水后輕柔渦旋震蕩,,室溫靜置溶解 10-30min,,讓粉末wan全溶解。

注意:加水后暫不用移液槍吹吸,,避免蛋白未溶解,,槍頭帶出部分蛋白,待wan全溶解后可吹吸或渦旋振蕩混勻,。

3. 標準品梯度稀釋:

1)標準品稀釋液的選擇:

若血清,、血漿、組織勻漿樣本,,用試劑盒中的標準品稀釋液,,梯度稀釋標準品。

若細胞上清樣本,,建議用細胞培養(yǎng)基梯度稀釋標準品,。

2)耗材準備:準備81.5Ml離心管,寫上S1-S7,、空白,。

3)梯度稀釋:根據(jù)說明書,每管加入等體積的標準品稀釋液(培養(yǎng)基),。吸取同體積溶解好的標準品到S1管中,,吹打10次混勻,渦旋5S,。從S1管中吸取同體積溶液到 S2管,,吹打10次混勻,渦旋5s,。同法稀釋S3-S7濃度,。

4)空白: 標準品稀釋液(培養(yǎng)基)作為空白即零濃度。

注意:梯度稀釋標準品時,,渦旋震蕩混勻后可短暫離心,,讓到蓋子,、壁上的液體到管底,再開始稀釋下個濃度,。


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