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ELISA試劑盒檢查中顯色液A和B效果分析
閱讀:310 發(fā)布時(shí)間:2023-2-15酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(enayme liked immunosorbent,ELISA)是20世紀(jì)70年代發(fā)展起來的一種檢查技能,因其具有靈敏性高,、特異性強(qiáng)、操作簡(jiǎn)略等長(zhǎng)處,被廣泛運(yùn)用于各種抗原和抗體的測(cè)定,。ELISA試劑盒檢查中顯色液A和B效果分解如下:
酶聯(lián)免疫確診試劑盒的底物A即是顯色劑A(含過氧化氫)為供氫體(DH2),底物B即是顯色劑B(含TMB),用于顯色,。別的,常用的底物還有:
AP的底物,,常用的為對(duì)-硝基苯磷酸脂(PNP),,其反響物為黃色的對(duì)硝基酚,測(cè)讀波長(zhǎng)為405nm2)GOD的底物,,為葡萄糖,,供氫體為對(duì)硝基藍(lán)四氮唑,反響商品為不溶性的藍(lán)色沉積啥是TMB,?TMB即四甲基聯(lián)苯胺(3,,3’,5,,5’-Tetramethylbenzidine)是一種脂溶性較強(qiáng)的基團(tuán),,因而簡(jiǎn)略進(jìn)入細(xì)胞與細(xì)胞器中的HRP反響,且因?yàn)檫@種高度的脂溶性,,使其易構(gòu)成多聚體,,在HRP活性部位發(fā)生粗大的、深蘭色沉積物,,這使得TMB變成組化試驗(yàn)中的一種ji 好的發(fā)色團(tuán),。一起反響商品的沉積,使得HRP的活性部位愈加露出,,利于酶氧化反響進(jìn)行,。
TMB的反響商品為深藍(lán)色,利于光鏡調(diào)查,,且反響商品越聚越大,,常超出單個(gè)細(xì)胞器的規(guī)模(而DAB則被約束在其內(nèi)),故TMB反響的檢查閾較低,。