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淺談培養(yǎng)細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)中的幾種試劑
閱讀:354 發(fā)布時(shí)間:2022-12-19細(xì)胞培養(yǎng)也叫細(xì)胞克隆技術(shù),,在生物學(xué)中的正規(guī)名詞為細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)。在培養(yǎng)細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)中有有幾種試劑是經(jīng)常用到的,。
1,、高糖DMEM溶液 用新配制的三蒸水配制,高糖DMEM干粉(規(guī)格10×1L),,溶入約總量的1/3的三蒸水,,并用水洗凈包裝袋,在磁力攪拌器上攪拌30分鐘,,加入NaHCO2 3.75克,,補(bǔ)加水至最終量。用1N HCL調(diào)整PH為7.2,,0.22μm濾膜抽濾除菌,,分裝-20℃保存,使用時(shí)加10%的胎牛血清及雙抗溶液(最終濃度:青霉素100U/ml,,鏈霉素 100μg/ml)
2,、胎牛血清 使用前56℃水浴30分鐘滅活,無(wú)菌條件下分裝成10ml包裝,,-20℃保存,。用時(shí)以10%濃度注入培養(yǎng)液中。
3,、 青霉素,、鏈霉素雙抗溶液 青霉素100萬(wàn)單位及硫酸鏈霉素1g無(wú)菌條件下溶于消毒三蒸水10ml,分裝,,-20℃保存,。使用時(shí)每1000ml培養(yǎng)液加入青、鏈霉素混合液1ml,最終濃度為青霉素100單位/ml,,鏈霉素100μg/ml,。
4、磷酸鹽溶液(PBS): NaCl 8g, KCl 0.4g, NaHPO4.H2O 1.15g KH2PO4 0.2g 分別溶于1000ml三蒸水中,,調(diào)節(jié)PH值至7.4高壓蒸氣滅菌,,分裝后4℃保存。
5,、胰蛋白酶溶液 用三蒸水制備成0.25%濃度,,0.22μm濾膜抽濾除菌,4℃保存,。
6,、0.1%明膠溶液 稱取明膠粉劑0.1g于燒杯中,加入三蒸水100mL于50℃充分?jǐn)嚢柚疗鋡an全溶解,,0.22μm濾膜抽濾除菌,,4℃保存,。