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技術(shù)文章

淺談細(xì)胞轉(zhuǎn)染的途徑

閱讀:218          發(fā)布時(shí)間:2022-12-6

細(xì)胞轉(zhuǎn)染是指將外源分子如DNA,,RNA等導(dǎo)入真核細(xì)胞的技術(shù)。轉(zhuǎn)染,,是將外源性基因?qū)爰?xì)胞內(nèi)的一種專門技術(shù),。隨著基因與蛋白功能研究的深入,轉(zhuǎn)染目前已成為實(shí)驗(yàn)室工作中經(jīng)常涉及的基本方法,。轉(zhuǎn)染的途徑大致可分為物理介導(dǎo),、化學(xué)介導(dǎo)和生物介導(dǎo)三類:

1、物理介導(dǎo):

電穿孔法,、顯微注射和基因槍屬于通過(guò)物理方法將基因?qū)爰?xì)胞的范例,。

2、化學(xué)介導(dǎo):

方法很多,,如經(jīng)典的磷酸鈣共沉淀法,、脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染方法、和多種陽(yáng)離子物質(zhì)介導(dǎo)的技術(shù),。

3,、生物介導(dǎo):

方法有較為原始的原生質(zhì)體轉(zhuǎn)染,和現(xiàn)在比較多見(jiàn)的各種病毒介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染技術(shù),。

理想細(xì)胞轉(zhuǎn)染方法,,應(yīng)該具有轉(zhuǎn)染效率高、細(xì)胞毒性小等優(yōu)點(diǎn),。病毒介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染技術(shù),,是目前轉(zhuǎn)染效率zui高的方法,同時(shí)具有細(xì)胞毒性很低的優(yōu)勢(shì),。但是,,病毒轉(zhuǎn)染方法的準(zhǔn)備程序復(fù)雜,常常對(duì)細(xì)胞類型有很強(qiáng)的選擇性,,在一般實(shí)驗(yàn)室中很難普及,。其它物理和化學(xué)介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染方法,則各有其特點(diǎn),。

需要指出的一點(diǎn),,無(wú)論采用哪種轉(zhuǎn)染技術(shù),,要獲得的轉(zhuǎn)染結(jié)果,可能都需要對(duì)轉(zhuǎn)染條件進(jìn)行優(yōu)化,。影響轉(zhuǎn)染效率的因素很多,,從細(xì)胞類型、細(xì)胞培養(yǎng)條件和細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),,到轉(zhuǎn)染方法的操作細(xì)節(jié),,都需要考慮。

應(yīng)用:在研究基因功能,、調(diào)控基因表達(dá),、突變分析和蛋白質(zhì)等生物學(xué)試驗(yàn)中。


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