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細胞冷凍yell freexirig是保存微生物或動植物細胞株的常用方法,。冷凍細胞到底該如何活化,，一個不小心,，細胞就受損了，今日總結(jié),，冷凍細胞活化的正確操作步驟:

1. 冷凍細胞之活化原則為快速解凍,，以避免冰晶重新結(jié)晶而對細胞造成傷害，導(dǎo)致細胞之死亡,。

2. 細胞活化后,，約需數(shù)日，或繼代一至二代,，其細胞生長或特性表現(xiàn)才會恢復(fù)正常(例如產(chǎn)生單株抗體或是其它蛋白質(zhì)),。

3.步驟：

①操作人員應(yīng)戴防護面罩及手套，防止冷凍管可能爆裂之傷害,。

②自液氮或干冰容器中取出冷凍管,，檢查蓋子是否旋緊，由于熱脹冷縮過程,，此時蓋子易松掉,。

③將新鮮培養(yǎng)基置于37 °C 水槽中回溫，回溫后噴以70 % 酒精并擦拭之,，移入無菌操作臺內(nèi),。

④取出冷凍管，立即放入37 °C 水槽中快速解凍,，輕搖冷凍管使其在1 分鐘內(nèi)全部融化,，以70%ethanol 擦拭保存管外部，移入無菌操作臺內(nèi),。

⑤取出0.9 ml 解凍之細胞懸浮液,，緩緩加入有培養(yǎng)基之培養(yǎng)容器內(nèi)(稀釋比例為1:10～1:15)，混合均勻,， 放入CO2 培養(yǎng)箱培養(yǎng)。另取0.1 ml 解凍細胞懸浮液作存活測試。

⑥解凍后是否立即去除冷凍保護劑(例如DMSO 或glycerol),，依細胞種類而異,，一般而言，大都不需要立即去除冷凍保護劑,。惟若要立即去除,，則將解凍之細胞懸浮液加入含有5-10 ml 培養(yǎng)基之離心管內(nèi)，離心1,000 rpm, 5 分鐘,，移去上清液,，加入新鮮培養(yǎng)基，混合均勻,，放入CO2 培養(yǎng)箱培養(yǎng),。

⑦若不需立即去除冷凍保存劑，則在解凍培養(yǎng)后隔日更換培養(yǎng)基,。