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 用于ELISA測定的標(biāo)本最為常用的是血清(漿),，有時因為特定的檢測目的,，也用到唾液、腦脊液,、尿液,、糞便等標(biāo)本。目前臨床上使用血清標(biāo)本測定的標(biāo)志物一般有傳染性病原體的抗原和抗體,、腫瘤標(biāo)志物、激素,、特種蛋白,、細(xì)胞因子和治療藥物等。對用于激素和治療藥物測定的血清標(biāo)本的收集,，要注意收集時間甚或體位有可能會對測定結(jié)果產(chǎn)生影響,。如可di松在早晨4～6點之間，會有一峰值出現(xiàn)：生長激素,、促黃體激素(LH)和促卵泡激素(FSH)均以陣發(fā)性方式釋放,，因此，在測定此類激素時,，有必要在密切相連的時間間隔內(nèi)采取數(shù)份血樣本,，以其中間值為測定值。又如當(dāng)從臥位變?yōu)檎玖⑽粫r,，血清中腎素活性將出現(xiàn)明顯增高,。再如治療藥物的檢測，應(yīng)根據(jù)藥代動力學(xué)選擇服藥后的最適時間抽血檢測,。用于傳染性病原體的抗原和抗體,、腫瘤標(biāo)志物和特種蛋白等的檢測的血清標(biāo)本的收集則沒有時間和體位方面的影響,，只是在處理和保存方面要考慮以下幾個方面：

 1、要注意避免出現(xiàn)嚴(yán)重溶血,。血紅蛋白中含有血紅素基團(tuán),，其有類似過氧化物的活性，因此,，在以HRP為標(biāo)記酶的ELISA測定中,，如血清標(biāo)本中血紅蛋白濃度較高，則其就很容易在溫育過程中吸附于固相,，從而與后面加入的HRP底物反應(yīng)顯色,。

   2、樣本的采集及血清分離中要注意盡量避免細(xì)菌污染,，一則細(xì)菌的生長,，其所分泌的一些酶可能會對抗原抗體等蛋白產(chǎn)生分解作用;二則一些細(xì)菌的內(nèi)源性酶如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶本身會對用相應(yīng)酶作標(biāo)記的測定方法產(chǎn)生非特異性干擾。

  3,、血清標(biāo)本如是以無菌操作分離,，則可以在2～8℃下保存一周，如為有菌操作,，則建議冰凍保存,。樣本的長時間保存，應(yīng)在-70℃以下,。

  4,、冰凍保存的血清標(biāo)本須注意避免因停電等造成的反復(fù)凍融。標(biāo)本的反復(fù)凍融所產(chǎn)生的機(jī)械剪切力將對標(biāo)本中的蛋白等分子產(chǎn)生破壞作用,，從而引起假陰性結(jié)果,。此外，凍融標(biāo)本的混勻亦應(yīng)注意,，不要進(jìn)行劇烈振蕩,，反復(fù)顛倒混勻即可。

   6,、標(biāo)本在保存中如出現(xiàn)細(xì)菌污染所致的混濁或絮狀物時,，應(yīng)離心沉淀后取上清檢測。