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雜交瘤細(xì)胞原代培養(yǎng)過程
閱讀:350 發(fā)布時(shí)間:2022-8-22雜交瘤細(xì)胞原代培養(yǎng)過程:
1.取出小鼠后瀝干酒精,,放入超凈臺(tái)內(nèi),,固定在泡沫板上。
2.用鑷子提起皮膚,,用解剖剪剪開皮膚一個(gè)橫切口,,將皮膚向上撕開,然后剪開肌肉等,,暴露出腹腔,,在左側(cè)找到脾臟,用彎頭眼科鑷取出脾臟,,置于無菌培養(yǎng)皿中,。
3.用生理鹽水將取出的脾臟清洗多次,并剔除多余無用的組織,。
4.將篩網(wǎng)置于平皿中,,脾臟置于篩網(wǎng)上,用彎頭鑷鑷住,,輕輕在篩網(wǎng)上進(jìn)行碾磨,,同時(shí)不停滴加不含血清的培養(yǎng)液沖洗。
5.將碾磨好的細(xì)胞懸液吸入至離心管中,,離心(1000rpm,5min),,吸去上清(去除血液等)。
6.加入10ml培養(yǎng)液,,吹打混勻,,取樣計(jì)數(shù)。
7.將稀釋好的細(xì)胞懸液分裝于培養(yǎng)瓶中,,輕輕搖晃混勻,,在培養(yǎng)瓶上。