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雜交瘤細胞原代培養(yǎng)過程
閱讀:298 發(fā)布時間:2022-8-22雜交瘤細胞原代培養(yǎng)過程:
1.取出小鼠后瀝干酒精,,放入超凈臺內(nèi),,固定在泡沫板上,。
2.用鑷子提起皮膚,用解剖剪剪開皮膚一個橫切口,,將皮膚向上撕開,,然后剪開肌肉等,暴露出腹腔,,在左側找到脾臟,,用彎頭眼科鑷取出脾臟,置于無菌培養(yǎng)皿中,。
3.用生理鹽水將取出的脾臟清洗多次,,并剔除多余無用的組織。
4.將篩網(wǎng)置于平皿中,,脾臟置于篩網(wǎng)上,,用彎頭鑷鑷住,輕輕在篩網(wǎng)上進行碾磨,,同時不停滴加不含血清的培養(yǎng)液沖洗,。
5.將碾磨好的細胞懸液吸入至離心管中,離心(1000rpm,5min),,吸去上清(去除血液等),。
6.加入10ml培養(yǎng)液,吹打混勻,,取樣計數(shù),。
7.將稀釋好的細胞懸液分裝于培養(yǎng)瓶中,輕輕搖晃混勻,,在培養(yǎng)瓶上,。