日韩av大片在线观看欧美成人不卡|午夜先锋看片|中国女人18毛片水多|免费xx高潮喷水|国产大片美女av|丰满老熟妇好大bbbbbbbbbbb|人妻上司四区|japanese人妻少妇乱中文|少妇做爰喷水高潮受不了|美女人妻被颜射的视频,亚洲国产精品久久艾草一,俄罗斯6一一11萝裸体自慰,午夜三级理论在线观看无码

PCR對(duì)照試驗(yàn)一般都會(huì)加陰性對(duì)照，陽性對(duì)照。如果你只想檢控PCR操作及擴(kuò)增,，就加水作為陰性對(duì)照,，陽性質(zhì)粒或者DNA作為陽性對(duì)照,。
如果你想監(jiān)控整個(gè)核酸提取過程,，及PCR過程的話，那就從核酸提取開始,，就將水作為陰性樣本做對(duì)照,，含模板DNA的菌或者病毒或者組織作為陽性對(duì)照。然而,，PCR對(duì)照試驗(yàn)結(jié)果好卻沒回收到目的片段參考見解：

　　1,、 連接用室溫保溫1小時(shí)，能滿足大多數(shù)克隆,，為提高效率,，需4oC過夜。

　　2,、 插入片段帶有污染,，使3`-T缺失，或抑制連接,，抑制轉(zhuǎn)化,。為此，將插入片段和pGEM-T正對(duì)照混合,，再連接,。如降低了對(duì)照的菌落數(shù)，插入片段需純化,，或重新制備,。如產(chǎn)生大量的藍(lán)斑，插入片段污染有核酸酶,，使pGEM-T或pGEM-T Easy載體3`-T缺失,。

　　3、插入片段不適于連接,。用凝膠純化的插入片段,，因受UV過度照射，時(shí)有發(fā)生,。UV過度照射會(huì)產(chǎn)生嘧啶二聚體,，不利于連接，DNA必需重新純化,。

　　4,、 帶有修復(fù)功能的耐熱DNA聚合酶的擴(kuò)增產(chǎn)物末端無A,，后者是pGEM-T或pGEM-T Easy載體克隆所需。加Taq DNA聚合酶和核苷酸可在末端加A,。詳情查pGEM-T pGEM-T Easy載體技術(shù)資料（TM042）,。

　　5、高度重復(fù)序列可能會(huì)不穩(wěn)定,，在擴(kuò)增中產(chǎn)生缺失和重排,，如發(fā)現(xiàn)插入片段高頻率地產(chǎn)生缺失和重排，需用重組缺陷大腸桿菌菌株,，如SURE細(xì)胞