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ELISA試劑盒檢測血清使用說明

閱讀:390          發(fā)布時間:2022-7-5

ELISA試劑盒檢測血清使用說明     大部分elisa檢測均以血清為標(biāo)本,。血清標(biāo)本可按慣例方法收集,應(yīng)留意防止溶血,,紅細(xì)胞溶解時會釋放出具有過氧化物酶活性的物質(zhì),,以HRP為符號的ELISA測定中,溶血標(biāo)本可能會添加非特異性顯色,。血清標(biāo)本宜在新鮮時檢測,。如有細(xì)菌污染,?菌體中可能含有內(nèi)源性HRP,,也會發(fā)生假陽性反應(yīng),。

       一般說來,在5天內(nèi)測定的血清標(biāo)本可放置于4℃,。超越一周測定的需-20℃保存,。凍住血清融解后,蛋白質(zhì)局部濃縮,,散布不均,,應(yīng)充沛混勻并防止發(fā)生氣泡?;鞚峄蛴谐练e的血清標(biāo)本應(yīng)先離心或過濾,,弄清后再檢測。重復(fù)凍融會使抗體效價下跌,,所以測抗體的血清標(biāo)本如需保存作屢次檢測,,宜少量分裝冰存。保存血清自收集時就應(yīng)留意無菌操作,,也可參加適當(dāng)防腐劑,。

ELISA試劑盒檢測血清使用說明:

1、要留意防止呈現(xiàn)嚴(yán)峻溶血,。血紅蛋白中含有血紅素基團(tuán),,其有類似過氧化物的活性,因而,,在以HRP為符號酶的ELISA測定中,,如血清標(biāo)本中血紅蛋白濃度較高,,則其就很簡單在溫育過程中吸附于固相,然后與后邊參加的HRP底物反應(yīng)顯色,。

2,、冰凍保存的血清標(biāo)本須留意防止因停電等形成的重復(fù)凍融。標(biāo)本的重復(fù)凍融所發(fā)生的機(jī)械剪切力將對標(biāo)本中的蛋白等分子發(fā)生損壞效果,,然后引起假陰性結(jié)果,。此外,凍融標(biāo)本的混勻亦應(yīng)留意,,不要進(jìn)行劇烈振蕩,,重復(fù)倒置混勻即可。

3,、標(biāo)本在保存中如呈現(xiàn)細(xì)菌污染所造成的的混濁或絮狀物時,,應(yīng)離心沉積后取上清檢測。

4,、樣本的收集及血清別離中要留意盡量防止細(xì)菌污染,,一則細(xì)菌的成長,其所分泌的一些酶可能會對抗原抗體等蛋白發(fā)生分化效果;二則一些細(xì)菌的內(nèi)源性酶如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶本身會對用相應(yīng)酶作符號的測定方法發(fā)生非特異性攪擾,。

5,、血清標(biāo)本如是以無菌操作別離,則可以在2~8℃下保存一周,,如為有菌操作,,則主張冰凍保存。樣本的長期保存,,應(yīng)在-70℃以下。


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