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熒光定量PCR的應(yīng)用領(lǐng)域
閱讀：1053 發(fā)布時(shí)間：2022-5-31熒光定量PCR的應(yīng)用領(lǐng)域：
1、 核酸定量分析:
對(duì)傳染性疾病進(jìn)行定量定性分析,，病原微生物或病毒含量的檢測(cè) , 比如近期流行的甲型H1N1流感,， 轉(zhuǎn)基因動(dòng)植物基因拷貝數(shù)的檢測(cè)，RNAi 基因失活率的檢測(cè)等,。
2,、 基因表達(dá)差異分析:
比較經(jīng)過不同處理樣本之間特定基因的表達(dá)差異 ( 如藥物處理、物理處理,、化學(xué)處理等 ) ,，特定基因在不同時(shí)相的表達(dá)差異以及cDNA芯片或差顯結(jié)果的確證
3、 SNP 檢測(cè):
檢測(cè)單核苷酸多態(tài)性對(duì)于研究個(gè)體對(duì)不同疾病的易感性或者個(gè)體對(duì)特定藥物的不同反應(yīng)有著重要的意義,，因分子信標(biāo)結(jié)構(gòu)的巧妙性,，一旦SNP 的序列信息是已知的，采用這種技術(shù)進(jìn)行高通量的 SNP 檢測(cè)將會(huì)變得簡(jiǎn)單而準(zhǔn)確,。
4,、 甲基化檢測(cè):
甲基化同人類的許多疾病有關(guān)，特別是癌癥,， Laird 報(bào)道了一種稱作 Methylight的技術(shù),，在擴(kuò)增之前先處理 DNA ,，使得未甲基化的胞嘧啶變成尿嘧啶，而甲基化的胞嘧啶不受影響,，用特異性的引物和 Taqman探針來區(qū)分甲基化和非甲基化的 DNA ,，這種方法不僅方便而且靈敏度更高。
醫(yī)學(xué)研究
5 ,、產(chǎn)前診斷：
人們對(duì)遺傳性物質(zhì)改變引起的遺傳性疾病還無法治療,，到目前為止，還只能只能通過產(chǎn)前監(jiān)測(cè),，減少病嬰出生,，以防止各類遺傳性疾病的發(fā)生，如為減少X連鎖遺傳病患兒的出生,，從孕婦的外周血中分離胎兒DNA,，用實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)其Y性別決定區(qū)基因是一種無創(chuàng)傷性的方法，易為孕婦所接受,。
6,、 病原體檢測(cè)：
采用熒光定量PCR檢測(cè)技術(shù)可以對(duì)淋球菌、沙眼衣原體,、解脲支原體、人類乳頭瘤病毒,、單純皰疹病毒,、人類免疫缺陷病毒、肝炎病毒,、流感病毒,、結(jié)核分枝桿菌、EB病毒和巨細(xì)胞病毒等病原體進(jìn)行定量測(cè)定,。與傳統(tǒng)的檢測(cè)方法相比具有靈敏度高,、取樣少、快速簡(jiǎn)便等優(yōu)點(diǎn),。
7,、 藥物療效考核：
對(duì)乙型肝炎病毒 (HBV)、丙型肝炎病毒 (HCV) 定量分析顯示：病毒量與某些藥物的療效關(guān)系,。HCV高水平表達(dá),，干擾素治療作用不敏感，而HCV低滴度,，干擾素作用敏感,；在拉米夫定治療過程中，HBV- DNA的血清含量曾有下降,，隨后若再度上升或超出以前水平,，則提示病毒發(fā)生變異,。
8、 腫瘤基因檢測(cè)：
盡管腫瘤發(fā)病的機(jī)理尚未清楚,，但相關(guān)基因發(fā)生突變是致癌性轉(zhuǎn)變的根本原因已被廣泛接受,。癌基因的表達(dá)增加和突變，在許多腫瘤早期就可以出現(xiàn),。實(shí)時(shí)熒光定量 PCR不但能有效地檢測(cè)到基因的突變,，而且可以準(zhǔn)確檢測(cè)癌基因的表達(dá)量。目前用此方法進(jìn)行過端粒酶hTERT基因,、慢性粒細(xì)胞性白血病WT1基因,、腫瘤 ER基因、前列腺癌PSM基因,、腫瘤相關(guān)的病毒基因等多種基因的表達(dá)檢測(cè),。