技術(shù)文章
如何正確溶解與稀釋ELISA標準品,?
閱讀:552 發(fā)布時間:2021-5-26ELISA標準曲線是結(jié)果計算的尺子,,標準品是ELISA 實驗成功與否的關(guān)鍵點,。怎樣正確溶解、稀釋標準品呢,?
1. 粉末標準品短暫離心,,讓因運輸沾到管蓋、管壁的標準品沉到管底,。
2. 根據(jù)瓶標簽加入一定體積的蒸餾水,,加水后輕柔渦旋震蕩,室溫靜置溶解 10-30min,,讓粉末*溶解,。
注意:加水后暫不用移液槍吹吸,避免蛋白未溶解,,槍頭帶出部分蛋白,,待*溶解后可吹吸或渦旋振蕩混勻,。
3. 標準品梯度稀釋:
(1)標準品稀釋液的選擇:
若血清、血漿,、組織勻漿樣本,,用試劑盒中的標準品稀釋液,梯度稀釋標準品,。
若細胞上清樣本,,建議用細胞培養(yǎng)基梯度稀釋標準品。
(2)耗材準備:準備8個1.5Ml離心管,,寫上S1-S7,、空白。
(3)梯度稀釋:根據(jù)說明書,,每管加入等體積的標準品稀釋液(培養(yǎng)基),。吸取同體積溶解好的標準品到S1管中,吹打10次混勻,,渦旋5S,。從S1管中吸取同體積溶液到 S2管,吹打10次混勻,,渦旋5s,。同法稀釋S3-S7濃度。
(4)空白: 標準品稀釋液(培養(yǎng)基)作為空白即零濃度,。
注意:梯度稀釋標準品時,,渦旋震蕩混勻后可短暫離心,讓到蓋子,、壁上的液體到管底,,再開始稀釋下個濃度。
標準品溶解,、梯度稀釋是ELISA實驗關(guān)鍵點,,按以上方法梯度稀釋就可,!