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人ELISA試劑盒實驗步驟:

1.  以稀釋液將待檢標(biāo)本做適當(dāng)稀釋（預(yù)試中確定）加入包被有已知抗原的酶標(biāo)板中（50ul/孔）,，加封口膠帶于37℃作用30min,。

2.  棄反應(yīng)液,，以沖洗液連續(xù)洗板5次并于吸水紙上拍干,。

3.  加入酶標(biāo)抗體（濃度在預(yù)試中確定）,。加封口膠帶后于37℃作用30min。

4.  重復(fù)第2步,。

5.  加底物（濃度在預(yù)試中確定）,，加封口膠帶后于室溫下避光作用5-60 min，其間不時觀察,，顯色滿意后加終止液50ul/孔,。

6.  于酶標(biāo)儀測定OD值，OPD用492nm測定，TMB用450nm測定,。
人ELISA試劑盒優(yōu)點：

（1）特異性高：進行了廣泛的非特異性排查,，避免了由于交叉反應(yīng)和干擾導(dǎo)致的實驗數(shù)據(jù)誤差。

（2）精度高：通過加標(biāo)回收率和線性稀釋實驗,，確保樣本值的準(zhǔn)確性,，度高于同類產(chǎn)品（較低的CV%）。

（3）重復(fù)性好：lot-to-lot檢測確保zui小的批間差異,。 

（4）可靠性強：經(jīng)優(yōu)化的試劑盒組分可有效的阻止假陽性和假陰性試驗結(jié)果,。 

（5）標(biāo)準(zhǔn)曲線：在保證數(shù)據(jù)的前提下提供較寬的檢測范圍，以滿足需求,。 

（6）價格低廉：*試劑，國內(nèi)分裝配置,，大大減少了客戶因為價格高而必須購買國產(chǎn)試劑盒的顧慮,。

人ELISA試劑盒注意事項:

1.  每次實驗均應(yīng)做陰性對照、陽性對照及空白對照（以PBS代替標(biāo)本）,，后者為本底值,，在分析實驗結(jié)果時應(yīng)扣除本底值，陽性對照<陰性對照<空白對照實驗成立,。

2.  一般認(rèn)為小分子抗原宜用本法檢測,，而大分子抗原則宜采用夾心法檢測，但具體宜采用哪種方法應(yīng)根據(jù)試驗決定,，本發(fā)與夾心法相比在操作上減少一步,。包被抗體與酶標(biāo)抗體如果分別采用單克隆抗體和多克隆抗體時，宜用單克隆抗體作為包被抗體,，以多克隆抗體作為酶標(biāo)抗體,。

3.  血清標(biāo)本中抗原濃度一般較低，故一般用原倍標(biāo)本進行檢測,，必要時可進行稀釋測定,，但應(yīng)重新摸索酶標(biāo)抗原的濃度，以確保方法的靈敏性,。

4.  以酶標(biāo)記抗原的方法同酶標(biāo)記抗體,。

5.  其它注意事項同酶聯(lián)免疫間接法。