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人ELISA試劑盒操作步驟事項
閱讀:437 發(fā)布時間:2021-4-22人Elisa試劑盒操作步驟 :
1.用蓋片鑷人Elisa試劑盒將蓋玻片自75%乙醇中取出,,用無菌絲綢布擦拭干凈,,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片),;
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時,;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中,;
5.將人Elisa試劑盒培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
人Elisa試劑盒注意事項:
1. 人Elisa試劑盒解凍與存放:-20℃取出后建議放入2~8℃冰箱中解凍約,,每隔一段時間輕輕搖晃均勻,不可直接放入溫度較高處解凍,,避免因溫度改變太大,,造成蛋白質(zhì)凝集而出現(xiàn)沉淀,血清的質(zhì)量下降,。若短期無法用完一瓶,,建議無菌分裝,再放回冷凍,避免反復凍融,。4℃長時間保存后血清中的變性脂蛋白及纖維蛋白,,形成絮狀物質(zhì)變差。
2.人Elisa試劑盒是否滅活:加熱可滅活血清中補體系統(tǒng),,在極少數(shù)情況下(培養(yǎng)ES細胞,,平滑肌細胞時)建議滅活,在培養(yǎng)其余細胞時不建議滅活血清,。血清滅活非常容易產(chǎn)生沉淀,,如必須滅活請按56℃,30 min,,輕微搖晃原則操作,,滅活溫度高、時間長,、搖晃不均都容易產(chǎn)生沉淀,。
3.人Elisa試劑盒培養(yǎng)基:無血清培養(yǎng)基在結(jié)果重復性、細胞體外分化方面有優(yōu)勢,,但是,,血清仍然是培養(yǎng)液中最基本的添加物,,尤其是在原代培養(yǎng)或細胞生長狀態(tài)不良時,常常會先使用有血清的培養(yǎng)液進行培養(yǎng),,待細胞生長旺盛后再換成無血清培養(yǎng)液,。