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技術(shù)文章

人ELISA試劑盒注意事項(xiàng)說(shuō)明

閱讀:171          發(fā)布時(shí)間:2021-3-10

人ELISA試劑盒標(biāo)本收集:

1,、血清:
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,。保存過(guò)程中如有沉淀形成,,應(yīng)再次離心。

2,、血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,,混合10-20分鐘后,,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心,。

3,、尿液:
用無(wú)菌管收集,。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,。保存過(guò)程中如有沉淀形成,,應(yīng)再次離心。胸腹水,、腦脊液參照此實(shí)行,。

4,、細(xì)胞培養(yǎng)上清:
人ELISA試劑盒檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集,。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/ 分),。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右,。通過(guò)反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并 放出細(xì)胞內(nèi)成份,。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,,應(yīng)再次離心。

5,、組織標(biāo)本:
切割標(biāo)本后,,稱取重量。加入一定量的PBS,,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度,。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分,。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,。分裝后一份待檢測(cè),,其余冷凍備用。

人ELISA試劑盒注意事項(xiàng):

1.確定人ELISA試劑盒在有效期內(nèi),;

2.仔細(xì)閱讀說(shuō)明書;

3.按說(shuō)明書確定所有試劑齊全(數(shù)量,、體積),;

4.標(biāo)本制備要規(guī)范,每份標(biāo)本體積要按2-3個(gè)復(fù)孔以上的量制備,,盡量分裝做備份。短期內(nèi)無(wú)法實(shí)驗(yàn)者,,注意低溫保存,;

5.根據(jù)檢測(cè)標(biāo)本數(shù)量確定所需試劑的量,;

6.準(zhǔn)備好所有實(shí)驗(yàn)額外所需物品,,如試管、吸頭,、移液器,、離心機(jī)等;

7.按說(shuō)明書將所用試劑平衡至室溫,,配制所需試劑。

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