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PCR檢測試劑盒原理：

 本試劑盒系由預(yù)包被豬瘟病毒重組E2蛋白的酶標板,、酶標記物及其他配套試劑組成,，應(yīng)用酶聯(lián)免疫法（ELISA）原理檢測豬血清,、血漿樣本中豬瘟病毒抗體,。實驗時在酶標板中加入對照血清和待檢樣本，經(jīng)溫育后若樣品中含有豬瘟病毒抗體,，則將與酶標板上抗原結(jié)合,，經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的其他成分后；再加入酶標記物,，與酶標板上抗原抗體復(fù)合物發(fā)生特異性結(jié)合,；再經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的酶標記物，在孔中加TMB底物液,，與酶反應(yīng)形成藍色產(chǎn)物,，顯色深淺與樣品中的特異性抗體含量成正相關(guān),；加入終止液終止反應(yīng)后，產(chǎn)物變?yōu)辄S色,；用酶標儀在450nm波長測定各反應(yīng)孔中的吸光值,，即可知樣品是否含有豬瘟病毒抗體。

PCR檢測試劑盒操作流程：

1. 整個檢測過程應(yīng)嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū),、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,，各區(qū)實驗服、儀器 ,、耗材應(yīng)獨立使用,，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭,；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置,。

2. 為避免RNA降解,，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測,；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理,。

3. 每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照,。

4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,，并應(yīng)瞬時離心。

5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū),，并單獨存放,。

6. 為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進行任何標記,。

7. 儀器 擴增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置；不同批號試劑不能混用,。

8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,，淬滅基因選擇None。

9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進行無害化處理后方可丟棄,。