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小鼠ELISA檢測試劑盒操作步驟

使用前,，將所有試劑充分混勻,。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡,，產(chǎn)生加樣上的誤差,。

根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復孔,。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定，能使用復孔的盡量做復孔,。標本用標本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應孔內(nèi),。

加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標記的抗體,。蓋上膜板,，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時,。

甩去孔內(nèi)液體,，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒,，甩去洗滌液,，用吸水紙拍干。重復此操作3次,。如果用洗板機洗滌,，洗滌次數(shù)增加一次。

每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,，輕輕振蕩混勻,，37℃溫育30分鐘。

甩去孔內(nèi)液體,，每孔加滿洗滌液,，振蕩30秒，甩去洗滌液,，用吸水紙拍干,。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,，洗滌次數(shù)增加一次,。

每孔加入底物A、B各50ul,，輕輕振蕩混勻,，37℃溫育10分鐘。避免光照,。

取出酶標板,，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應立即測定結(jié)果,。

在450nm波長處測定各孔的OD值,。

6號標準品以上的結(jié)果為非線性的，根據(jù)此標準曲線無法得到的結(jié)果,。

小鼠ELISA檢測試劑盒試劑盒性能

1. 靈敏度:小的檢測濃度小于1號標準品,。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990,。

2. 特異性:不與其它細胞因子反應,。

3. 重復性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。

結(jié) 果 判 斷 與 分 析

1,、儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值

2,、以吸光度OD值為縱坐標(Y)，相應的ALT標準品濃度為橫坐標(X),，做得相應的曲線,，樣品的ALT含量可根據(jù)其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。

3,、檢測值范圍:0-240IU/L

4,、敏感度: 0.1 IU/L