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大鼠ELISA檢測試劑盒注意事項：

1,、操作前應(yīng)對實驗的物理參數(shù)有充分的了解,，如環(huán)境溫度(保持在18 C～25℃)、反應(yīng)孵育溫度和孵育時間,、洗滌的次數(shù)等,，要先查看水育箱溫度，是否符合要求,。

2,、正確使用加樣器加樣器應(yīng)垂直加入標(biāo)本或試劑，避免刮擦包被板底部,。加樣過程中避免液體外濺,，血清殘留在反應(yīng)孔壁上，加樣器吸頭要清洗干凈,，避免污染,，加樣次序要與說明書一致，否則可導(dǎo)致結(jié)果錯誤,，實驗重復(fù)性差,。

3、手工洗板加洗液時沖擊力不要太大,，洗滌次數(shù)不要超過說明書推薦的洗滌次數(shù),，洗液在反應(yīng)孔內(nèi)滯留的時間不宜太長。不要使洗液在孔間竄流,，造成孔問污染,，導(dǎo)致假陰性或假陽性。

4,、 進(jìn)口大鼠要保證加液量一致 我們在使用時感覺滴瓶加液不如加樣器好,，滴瓶不易控制加液量不準(zhǔn)，造成顯色不統(tǒng)一,，判斷錯誤,。

5、顯色液量不可過多 加樣的工作環(huán)境不能處于陽光直射的環(huán)境下,，加顯色系統(tǒng)后要避光反應(yīng),，顯色液量不能過多,，以免顯色過強。

6,、試劑的影響因數(shù)：應(yīng)選用有國家批準(zhǔn)文號,，質(zhì)量靠得住的產(chǎn)品，不能圖便宜,，忽視質(zhì)量保證,。試劑應(yīng)妥善保存于4℃冰箱內(nèi)，在使用時先平衡至室溫,，不同批號的試劑組分不宜交叉使用,。試劑開啟后要在一周內(nèi)用完，剩余的試劑下次用時應(yīng)先檢查是否變質(zhì),，,，顯色劑如被污染變色將造成全部顯色，導(dǎo)致錯誤結(jié)果,。過期的試劑不宜再用，若別無選擇,，ELISA試劑盒進(jìn)口大鼠應(yīng)做好雙份質(zhì)控品的監(jiān)測,，確保結(jié)果的可靠性。

大鼠ELISA檢測試劑盒標(biāo)本收集步驟： 

包括血清,、血漿,、尿液、胸腹水,、腦脊液,、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。

1,、血清：
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清,。保存過程中如有沉淀形成,，應(yīng)再次離心。

2,、血漿：
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA,、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后,，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）,。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,，應(yīng)再次離心,。

3,、尿液：
用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）,。仔細(xì)收集上清,。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心,。胸腹水,、腦脊液參照此實行。

4,、細(xì)胞培養(yǎng)上清：
檢測分泌性的成份時,，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/ 分）,。仔細(xì)收集上清,。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液,，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右,。通過反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并 放出細(xì)胞內(nèi)成份,。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）,。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,，應(yīng)再次離心,。

5、組織標(biāo)本：
切割標(biāo)本后,，稱取重量,。加入一定量的PBS，PH7.4,。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4）,，用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分,。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清,。分裝后一份待檢測,，其余冷凍備用。