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大鼠ELISA檢測(cè)試劑盒樣本收集步驟方法
閱讀：312 發(fā)布時(shí)間：2021-1-27大鼠ELISA檢測(cè)試劑盒注意事項(xiàng)：
1,、操作前應(yīng)對(duì)實(shí)驗(yàn)的物理參數(shù)有充分的了解,，如環(huán)境溫度(保持在18 C～25℃),、反應(yīng)孵育溫度和孵育時(shí)間、洗滌的次數(shù)等，要先查看水育箱溫度,，是否符合要求,。
2、正確使用加樣器加樣器應(yīng)垂直加入標(biāo)本或試劑,，避免刮擦包被板底部,。加樣過(guò)程中避免液體外濺，血清殘留在反應(yīng)孔壁上,，加樣器吸頭要清洗干凈,，避免污染，加樣次序要與說(shuō)明書一致,，否則可導(dǎo)致結(jié)果錯(cuò)誤，實(shí)驗(yàn)重復(fù)性差,。
3,、手工洗板加洗液時(shí)沖擊力不要太大，洗滌次數(shù)不要超過(guò)說(shuō)明書推薦的洗滌次數(shù),，洗液在反應(yīng)孔內(nèi)滯留的時(shí)間不宜太長(zhǎng),。不要使洗液在孔間竄流，造成孔問污染,，導(dǎo)致假陰性或假陽(yáng)性,。
4、 進(jìn)口大鼠要保證加液量一致 我們?cè)谑褂脮r(shí)感覺滴瓶加液不如加樣器好,，滴瓶不易控制加液量不準(zhǔn),，造成顯色不統(tǒng)一，判斷錯(cuò)誤,。
5,、顯色液量不可過(guò)多 加樣的工作環(huán)境不能處于陽(yáng)光直射的環(huán)境下，加顯色系統(tǒng)后要避光反應(yīng),，顯色液量不能過(guò)多,，以免顯色過(guò)強(qiáng)。
6,、試劑的影響因數(shù)：應(yīng)選用有國(guó)家批準(zhǔn)文號(hào),，質(zhì)量靠得住的產(chǎn)品，不能圖便宜,，忽視質(zhì)量保證,。試劑應(yīng)妥善保存于4℃冰箱內(nèi)，在使用時(shí)先平衡至室溫,，不同批號(hào)的試劑組分不宜交叉使用,。試劑開啟后要在一周內(nèi)用完，剩余的試劑下次用時(shí)應(yīng)先檢查是否變質(zhì)，,，顯色劑如被污染變色將造成全部顯色,，導(dǎo)致錯(cuò)誤結(jié)果。過(guò)期的試劑不宜再用,，若別無(wú)選擇,，ELISA試劑盒進(jìn)口大鼠應(yīng)做好雙份質(zhì)控品的監(jiān)測(cè)，確保結(jié)果的可靠性,。
大鼠ELISA檢測(cè)試劑盒標(biāo)本收集步驟：
包括血清,、血漿、尿液,、胸腹水,、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等,。
1,、血清：
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）,。仔細(xì)收集上清,。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心,。
2,、血漿：
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,，混合10-20分鐘后,，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清,。保存過(guò)程中如有沉淀形成,，應(yīng)再次離心。
3,、尿液：
用無(wú)菌管收集,。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清,。保存過(guò)程中如有沉淀形成,，應(yīng)再次離心。胸腹水,、腦脊液參照此實(shí)行,。
4、細(xì)胞培養(yǎng)上清：
檢測(cè)分泌性的成份時(shí),，用無(wú)菌管收集,。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/ 分）,。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液,，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融,，以使細(xì)胞破壞并 放出細(xì)胞內(nèi)成份,。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清,。保存過(guò)程中如有沉淀形成,，應(yīng)再次離心。
5,、組織標(biāo)本：
切割標(biāo)本后,，稱取重量。加入一定量的PBS,，PH7.4,。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度,。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分,。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）,。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),，其余冷凍備用,。