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大鼠Elisa試劑盒幾點(diǎn)的操作流程
閱讀:215 發(fā)布時(shí)間:2020-11-11大鼠Elisa試劑盒試驗(yàn)原理:
大鼠Elisa試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA).已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)品,、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè),。先將生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后,,加入親和素標(biāo)記過(guò)的HRP,。再經(jīng)過(guò)溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,,然后加入底物A,、B,和酶結(jié)合物同時(shí)作用,。產(chǎn)生顏色,。顏色的深淺和樣品中的濃度呈比例關(guān)系。
大鼠Elisa試劑盒操作流程:
1. 整個(gè)檢測(cè)過(guò)程應(yīng)嚴(yán)格按照本說(shuō)明書(shū)要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū),、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 ,、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭,;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置,。
2. 為避免RNA降解,,樣本處理過(guò)程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè),;樣本處理過(guò)程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過(guò)無(wú)核酶處理,。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽(yáng)性對(duì)照,。
4.大鼠Elisa試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,,并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5. 進(jìn)口Elisa試劑盒內(nèi)所配陰性和陽(yáng)性對(duì)照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),,并單獨(dú)存放,。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記,。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說(shuō)明書(shū)相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號(hào)試劑不能混用,。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,,淬滅基因選擇None,。
9. 實(shí)驗(yàn)過(guò)程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無(wú)害化處理后方可丟棄。
大鼠Elisa試劑盒安全性:
1. 避免直接接觸終止液和底物A,、B,。一旦接觸到這些液體,請(qǐng)盡快用水沖洗,。
2. 實(shí)驗(yàn)中不要吃喝,、抽煙或使用化妝品。
3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份,。
4. 大鼠Elisa試劑盒應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存,,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,,不可保存,。
5. 實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,,以免變質(zhì),。
6. 不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用,。保質(zhì)前使用,。
7. 使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A,、B液時(shí),,避免使用帶金屬部分的加樣器。
8. 使用干凈的塑料容器配置洗滌液,。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品,。
9. 洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水,。
10. 底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子,。底物B對(duì)光敏感,,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,,有毒,。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
11. 加入試劑的順序應(yīng)一致,,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣,。
12. 按照說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作,。