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進(jìn)口Elisa試劑盒原理與特點(diǎn)
閱讀:404 發(fā)布時間:2020-11-4進(jìn)口Elisa試劑盒原理:
采用競爭法測定金黃地鼠氧化低密度脂蛋白OXLDL水平。用金黃地鼠氧化低密度脂蛋白OXLDL抗原包被微孔板,,制成固相載體,,實(shí)驗(yàn)時依次在微孔板中加入標(biāo)本及標(biāo)準(zhǔn)品,并加入HRP標(biāo)記的OXLDL抗體,,標(biāo)本及標(biāo)準(zhǔn)品中的抗體和一定量的酶標(biāo)抗體競爭與固相抗原結(jié)合,。反復(fù)洗滌后加底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化為藍(lán)色,,再用硫酸終止反應(yīng),,轉(zhuǎn)變成黃色。標(biāo)本中抗體量越多,,結(jié)合在固相上的酶標(biāo)抗體愈少,,顏色越淺。顏色的深淺和樣品中的OXLDL含量呈負(fù)相關(guān),。采用酶標(biāo)儀在450nm波長測定吸光度(OD值),,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線,計(jì)算測試樣品中OXLDL濃度,。
進(jìn)口Elisa試劑盒操作步驟:
1.使用前將試劑盒置室溫30分鐘,,恢復(fù)至室溫,。
2.取所需用量酶標(biāo)板條,設(shè)空白對照1孔,、陰性/陽性對照各2孔,,未用的板條盡快密封,2~8℃保存,。
3.空白對照孔加樣品稀釋液100μl,;陰、陽性對照孔分別加入陰,、陽性對照100μl,;樣品孔每孔加入稀釋后的樣品100μl。
4.混勻,,置37℃反應(yīng)30分鐘,。
5.扣去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,,靜置30秒后棄去,,重復(fù)洗滌5次,拍干,。
6.每孔加酶標(biāo)記物100μl(空白孔除外),。置37℃反應(yīng)30分鐘。
7.洗滌,,同步驟5,。
8.每孔依次加底物液A、底物液B各50μl,,混勻,37℃避光反應(yīng)10分鐘,。
9.每孔加終止液50μl,,混勻,用空白孔調(diào)零,,于450nm(可用630nm作參比波長)測定各孔吸光值(A值),。
進(jìn)口Elisa試劑盒注意事項(xiàng):
1.實(shí)驗(yàn)操作時需戴手套、穿工作衣,,嚴(yán)格健全和執(zhí)行消毒隔離制度,,各種實(shí)驗(yàn)廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
2.終止液具有腐蝕性,,應(yīng)避免接觸皮膚和衣物,,如不慎接觸請立即用大量自來水沖洗。
3.酶標(biāo)板從冷藏環(huán)境中取出時應(yīng)恢復(fù)至室溫方可開袋,,未用完的酶標(biāo)板需放入有干燥劑的密封袋中保存,。
4.濃縮洗滌液在低溫時容易結(jié)晶,,使用時需恢復(fù)至室溫以*溶解。
5.洗滌時各孔均需加滿液體,,防止孔口有游離酶不能洗凈,。
6.用于檢測的樣品應(yīng)保持新鮮。
7.試驗(yàn)結(jié)果的判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn),。
8.不同批號試劑組分不得混用,。
進(jìn)口Elisa試劑盒特點(diǎn):
一、高效,、靈敏,、特異的抗體。
二,、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性,。
三、吸附性能好,,空白值低,,孔底透明度高的固相載體。
四,、適用血清,、血漿、組織勻漿液,、細(xì)胞培養(yǎng)上清液,、尿液等等多種標(biāo)本類型。
五,、節(jié)省實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi),。