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進口Elisa試劑盒原理與特點
閱讀：358 發(fā)布時間：2020-11-4進口Elisa試劑盒原理：
采用競爭法測定金黃地鼠氧化低密度脂蛋白OXLDL水平,。用金黃地鼠氧化低密度脂蛋白OXLDL抗原包被微孔板,，制成固相載體,，實驗時依次在微孔板中加入標(biāo)本及標(biāo)準品,，并加入HRP標(biāo)記的OXLDL抗體，標(biāo)本及標(biāo)準品中的抗體和一定量的酶標(biāo)抗體競爭與固相抗原結(jié)合,。反復(fù)洗滌后加底物TMB顯色,。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化為藍色，再用硫酸終止反應(yīng),，轉(zhuǎn)變成黃色,。標(biāo)本中抗體量越多，結(jié)合在固相上的酶標(biāo)抗體愈少,，顏色越淺,。顏色的深淺和樣品中的OXLDL含量呈負相關(guān)。采用酶標(biāo)儀在450nm波長測定吸光度（OD值）,，根據(jù)標(biāo)準曲線,，計算測試樣品中OXLDL濃度。
進口Elisa試劑盒操作步驟：
1.使用前將試劑盒置室溫30分鐘,，恢復(fù)至室溫,。
2.取所需用量酶標(biāo)板條，設(shè)空白對照1孔,、陰性/陽性對照各2孔,，未用的板條盡快密封，2～8℃保存,。
3.空白對照孔加樣品稀釋液100μl,；陰、陽性對照孔分別加入陰,、陽性對照100μl,；樣品孔每孔加入稀釋后的樣品100μl。
4.混勻,，置37℃反應(yīng)30分鐘,。
5.扣去孔內(nèi)液體,，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去,，重復(fù)洗滌5次,，拍干。
6.每孔加酶標(biāo)記物100μl（空白孔除外）,。置37℃反應(yīng)30分鐘,。
7.洗滌，同步驟5,。
8.每孔依次加底物液A,、底物液B各50μl，混勻,，37℃避光反應(yīng)10分鐘,。
9.每孔加終止液50μl，混勻,，用空白孔調(diào)零,，于450nm(可用630nm作參比波長）測定各孔吸光值（A值）。
進口Elisa試劑盒注意事項：
1.實驗操作時需戴手套,、穿工作衣,，嚴格健全和執(zhí)行消毒隔離制度，各種實驗廢棄物都應(yīng)按傳染物處理,。
2.終止液具有腐蝕性,，應(yīng)避免接觸皮膚和衣物，如不慎接觸請立即用大量自來水沖洗,。
3.酶標(biāo)板從冷藏環(huán)境中取出時應(yīng)恢復(fù)至室溫方可開袋,，未用完的酶標(biāo)板需放入有干燥劑的密封袋中保存。
4.濃縮洗滌液在低溫時容易結(jié)晶,，使用時需恢復(fù)至室溫以*溶解,。
5.洗滌時各孔均需加滿液體，防止孔口有游離酶不能洗凈,。
6.用于檢測的樣品應(yīng)保持新鮮,。
7.試驗結(jié)果的判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準。
8.不同批號試劑組分不得混用,。
進口Elisa試劑盒特點：
一,、高效、靈敏,、特異的抗體,。
二、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性,。
三,、吸附性能好,，空白值低，孔底透明度高的固相載體,。
四,、適用血清、血漿,、組織勻漿液,、細胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類型,。
五,、節(jié)省實驗經(jīng)費。