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ELISA試劑盒原理與特點(diǎn)
閱讀:788 發(fā)布時(shí)間:2020-10-21ELISA試劑盒原理:
免疫測(cè)定技術(shù)的基礎(chǔ)在于抗原抗體之間的特異結(jié)合反應(yīng),所以任何優(yōu)質(zhì)的診斷試劑離不開優(yōu)質(zhì)的原料,,如抗原抗體,,酶等。以前用于免疫測(cè)定的抗原通常為各種純化抗原,,而抗體則為純化抗原免疫動(dòng)物后獲得的多克隆抗體和使用雜交瘤技術(shù)得到的單克隆抗體,,而抗原或抗體的標(biāo)記物如酶標(biāo)結(jié)合物則通過(guò)各種化學(xué)合成方法制備。近年來(lái),,隨著分子生物學(xué)的發(fā)展,,使用基因工程方法制備各種特殊的抗原或抗體及其酶結(jié)合物等免疫測(cè)定試劑幾成為現(xiàn)實(shí)的新一代試劑,各種新型使用的測(cè)定方法也不斷出現(xiàn),。
ELISA試劑盒用途:
ELISA試劑盒基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記,。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,,又保留酶的活性,。在測(cè)定時(shí),受檢標(biāo)本(測(cè)定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng),。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開,。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,也通過(guò)反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上,。此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例,。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),,故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析,。由于酶的催化效率很高,間接地放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果,,使測(cè)定方法達(dá)到很高的敏感度,。 ELISA可用于測(cè)定抗原,也可用于測(cè)定抗體,。
ELISA試劑盒特點(diǎn):
一,、高效、靈敏,、特異的抗體,。
二,、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性,。
三、吸附性能好,,空白值低,,孔底透明度高的固相載體。
四,、適用血清,、血漿、組織勻漿液,、細(xì)胞培養(yǎng)上清液,、尿液等等多種標(biāo)本類型。
五,、節(jié)省實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi),。
ELISA試劑盒安全性:
1. 避免直接接觸終止液和底物A、B,。一旦接觸到這些液體,,請(qǐng)盡快用水沖洗。
2. 實(shí)驗(yàn)中不要吃喝,、抽煙或使用化妝品,。
3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
4. ELISA試劑盒應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書儲(chǔ)存,,使用前恢復(fù)到室溫,。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存,。
5. 實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,,密封保存,以免變質(zhì),。
6. 不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好,。不同的試劑不要混用,。保質(zhì)前使用。
7. 使用一次性的吸頭以免交叉污染,,吸取終止液和底物A,、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器,。
8. 使用干凈的塑料容器配置洗滌液,。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。