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上海撫生與您分享ELISA試劑盒洗滌的方法以及注意事項
閱讀:174 發(fā)布時間:2020-7-27一,、浸泡式
1..吸干或甩干孔內(nèi)反應(yīng)液,;
2..用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),;
3.浸泡,,即將洗滌液注滿板孔,放置1-2 分鐘,,間歇搖動,,浸泡時間不可隨意縮短;
4.吸干孔內(nèi)液體,。吸干應(yīng)*,,可用水泵或真空泵抽吸,也可甩去液體后在清潔毛巾或吸水紙上拍干,;
5.重復(fù)操作c 和d,,洗滌3-4次(或按說明規(guī)定)。在間接法中如本底較高,,可增加洗滌次數(shù)或延長浸泡時
間,。微量滴定板多采用浸泡式洗滌法。洗滌液多為含非離子型洗滌劑的中性緩沖液。聚苯乙烯載體與
蛋白質(zhì)的結(jié)合是疏水性的,,非離子型洗滌劑既含疏水基團(tuán),,也含親水基團(tuán),其疏水基團(tuán)與蛋白質(zhì)的疏
水基團(tuán)借疏水鍵結(jié)合,,從而削弱蛋白質(zhì)與固相載體的結(jié)合,,并借助于親水基團(tuán)和水分子的結(jié)合作用,
使蛋白質(zhì)回復(fù)到水溶液狀態(tài),,從而脫離固相載體,。洗滌液中的非離子型洗滌劑一般是吐溫 20,其濃度
可在0.05%-0.2%之間,,高于0.2%時,,可使包被在固相上的抗原或抗體解吸附而減低試驗的靈敏度。
二,、流水沖洗式
流水沖洗法初用于小珠載體的洗滌,,洗滌液僅為蒸餾水甚至可用自來水。洗滌時附接一特殊裝置,,
使小珠在流水沖擊下不斷地滾動淋洗,,持續(xù)沖洗 2 分鐘后,吸干液體,,再用蒸餾水浸泡2 分鐘,,吸干
即可。浸泡式猶如盆浴,,流水沖洗式則好比淋浴,,其洗滌效果更為*,且也簡便,、快速,。
已有實驗表明,流水沖洗式同樣也適用于微量滴定板的洗滌,。洗滌時設(shè)法加大水流量或加大水壓,,讓
水流沖擊板孔表面,洗滌效果更佳,。